临床研究
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世界华人消化杂志. 2006-06-28; 14(18): 1780-1784
Published online 2006-06-28. doi: 10.11569/wcjd.v14.i18.1780
抗癌胚抗原单链抗体的原核表达及对人胃癌的检测
徐宏勇, 徐立, 高建宏, 杨建军, 李开宗, 窦科峰
徐宏勇, 高建宏, 杨建军, 解放军第451医院肝胆普外科 陕西省西安市 710054
徐立, 第四军医大学西京医院全军消化病研究所 陕西省西安市 710032
李开宗, 窦科峰, 第四军医大学西京医院肝胆外科 陕西省西安市 710032
徐宏勇, 2003年第四军医大学博士, 主治医师, 主要从事肝胆肿瘤疾病及免疫学治疗、肝移植等研究.
基金项目: 国家自然科学基金项目, No. 39900068; 西安市科技攻关计划项目, No. GG05168.
通讯作者: 徐宏勇, 710054, 陕西省西安市友谊东路269号, 解放军第451医院肝胆普外科. hongyongxu@medmail.com
电话: 029-84734128
收稿日期: 2006-04-16
修回日期: 2006-05-01
接受日期: 2006-05-11
在线出版日期: 2006-06-28
Abstract

目的: 探讨T84.66单链抗体的原核表达及对6种胃癌细胞系及胃癌组织的特异性亲和力.

方法: 将抗CEA单链抗体T84.66的cDNA插入噬菌粒载体pCANTAB5E, 获得噬菌粒载体T84.66-scFv-pCANTAB5E. 将后者转化入E.coli HB2151, 经β, D异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达. 采用细胞培养及免疫细胞/组织化学方法, 检测胃癌细胞中及石蜡包埋的胃癌组织中的癌胚抗原表达.

结果: SDS-PAGE及Western blot证实, T84.66单链抗体蛋白分子正确表达. T84.66单链抗体可结合KATOⅢ, HGC-27和MKN45, 表明这3种细胞表达了特异性肿瘤抗原; 单链抗体不能结合SGC7901, GC803, BGC823. 42例胃癌组织癌胚抗原阳性率早期和进展期分别为55%(6/11)和61%(19/31), 在正常胃黏膜组织标本中无表达, 二者之间存在显著性差异 (P<0.05).

结论: KATOⅢ等胃癌细胞系可表达癌胚抗原. 后者在胃癌组织表达水平较高, 而正常胃组织不表达.

Keywords: 胃癌细胞; 单链抗体; 原核表达; 癌胚抗原