基础研究
Copyright ©The Author(s) 2020. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2020-06-28; 28(12): 475-485
Published online 2020-06-28. doi: 10.11569/wcjd.v28.i12.475
真核起始因子3e亚基与原发性肝细胞癌的发生与发展正相关
张珊, 陈忠伟, 孟诗敏, 丁庆林, 钟自彪, 魏艳红, 叶啟发, 胡康洪
张珊, 陈忠伟, 孟诗敏, 丁庆林, 魏艳红, 胡康洪, 湖北工业大学生物工程与食品学院湖北省工业微生物重点实验室中德生物医学中心 教育部及国家外专局"细胞调控与分子药物学科111创新引智基地" 湖北省武汉市 430068
张珊, 硕士研究生, 研究方向为分子病毒学.
钟自彪, 叶啟发, 武汉大学肝胆疾病研究院 武汉大学中南医院 湖北省武汉市 430071
基金项目: 湖北工业大学高层次人才启动基金, No. 337203; 武汉大学医学腾飞计划, No. TFLC 2018003.
作者贡献分布: 此课题由胡康洪和叶啟发设计; 研究过程由张珊、陈忠伟、孟诗敏及丁庆林操作完成; 数据分析由张珊、钟自彪、魏艳红完成; 论文写作由胡康洪和张珊完成.
通讯作者: 胡康洪, 博士, 教授, 430068, 湖北省武汉市南李路28号, 湖北工业大学中德生物医学中心 教育部及国家外专局"细胞调控与分子药物学科111创新引智基地". hukh@hbut.edu.cn
收稿日期: 2020-05-07
修回日期: 2020-05-16
接受日期: 2020-05-28
在线出版日期: 2020-06-28
Abstract
背景

真核起始因子3 (eukaryotic initiation factor 3, eIF3)是哺乳动物细胞中最复杂的翻译起始因子, 真核起始因子3e亚基(eukaryotic initiation factor 3e subunit, eIF3e)是eIF3 13个亚基中的一个, 其表达水平的失调与癌症的发生和发展密切相关. 然而, eIF3e在不同类型的恶性肿瘤中的报道相互矛盾. 迄今为止, eIF3e在原发性肝细胞癌(primary hepatocellular carcinoma, HCC)中的作用不明.

目的

研究eIF3e在HCC发生和发展中的作用.

方法

从临床上随机获取5例HCC病人手术后的新鲜肝癌组织及癌旁组织标本, 用qRT-PCR和Western Blot分别定量检测肝癌组织和癌旁组织内eIF3e的mRNA转录水平和蛋白表达水平. 通过转染eIF3e过表达质粒或eIF3e干扰质粒进入HepG2, 用qRT-PCR及Western Blot分别定量检测细胞内eIF3e转录和翻译表达水平, 证实eIF3E过表达上调和干扰后的下调. 用Kit-8细胞计数法(Cell Counting Kit-8, CCK-8)评价细胞增殖行为; 用划痕实验观察细胞迁移行为; 用流氏分析法调查细胞凋亡行为; 运用裸鼠成瘤实验评价eIF3e对肿瘤生长的影响.

结果

和癌旁组织比较, 发现肝癌组织中eIF3e上调. 细胞实验证实, 肝癌细胞系HepG2及Huh7中eIF3e mRNA转录水平均高于正常肝细胞系HL7702. 过表达质粒和干扰质粒分别瞬时转染HepG2, 发现eIF3e上调后增强了HepG2增殖和迁移行为, 但对细胞凋亡无影响; 而eIF3e下调后, 减弱了HepG2增殖和迁移行为, 促进凋亡; 裸鼠实验结果证实eIF3e促进肿瘤生长.

结论

eIF3e的过表达与原发性肝细胞癌的发生和发展正相关, 有潜力成为HCC治疗新靶点.

Keywords: 真核起始因子3e亚基; 原发性肝细胞癌; 增殖; 迁移; 凋亡; 肿瘤发生

核心提要: 已陆续有报道真核起始因子3e亚基(eukaryotic initiation factor 3e subunit, eIF3e)在不同类型的恶性肿瘤中发挥作用, 但其究竟是致癌基因还是抑癌因子仍有争议. 迄今为止, eIF3e在原发性肝细胞癌(primary hepatocellular carcinoma, HCC)中的作用尚不清楚. 本论文通过组织水平、细胞模型和动物实验系统地调查了eIF3e在HCC发生和发展中的作用, 发现该基因的表达与肝癌细胞增殖、迁移、凋亡等行为正相关, 裸鼠实验结果证实eIF3e促进肿瘤生长. 该研究提示eIF3e有潜力成为HCC治疗新靶点或与诊断预后相关的生物标志物.