基础研究
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世界华人消化杂志. 2016-10-28; 24(30): 4177-4184
Published online 2016-10-28. doi: 10.11569/wcjd.v24.i30.4177
PPTA抑制肝癌细胞HCCLM3的增殖、周期和迁移
张志杨, 朱海杭, 贾平, 陈春燕, 郁飞
张志杨, 朱海杭, 贾平, 陈春燕, 郁飞, 扬州大学临床医学院 江苏省扬州市 225001
朱海杭, 苏北人民医院胃肠中心 江苏省扬州市 225001
张志杨, 在读硕士, 主要从事消化内科方向的研究.
作者贡献分布: 此课题由张志杨与朱海杭设计; 研究过程由张志杨与贾平共同完成; 数据分析由张志杨完成; 文献查阅由陈春燕与郁飞共同完成; 本文写作由张志杨与朱海杭共同完成.
通讯作者: 朱海杭, 教授, 主任医师, 225001, 江苏省扬州市南通西路98号, 苏北人民医院胃肠中心. zhuhaihang@medmail.com.cn
电话: 0514-87373295
收稿日期: 2016-08-01
修回日期: 2016-08-16
接受日期: 2016-09-13
在线出版日期: 2016-10-28
Abstract
目的

初步研究PPTA对肝癌细胞HCCLM3增殖、周期和迁移的作用及机制.

方法

分别采用四甲基偶氮唑蓝法(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)、流式细胞术、细胞划痕实验, 观察PPTA对肝癌细胞HCCLM3增殖、周期和迁移的影响; 采用细胞免疫荧光实验法观察PPTA对HCCLM3细胞肌动蛋白纤维的分布、丝状和片状伪足形成等的影响; 采用Western blot法检测肝癌细胞HCCLM3中蛋白激酶B(protein kinase B, AKT)和细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)的表达.

结果

PPTA对HCCLM3细胞有抑制作用, 抑制HCCLM3细胞增殖的IC50在50 μmol/L以下. 当PPTA浓度为40 μmol/L时, 对HCCLM3细胞周期有抑制作用. PPTA对HCCLM3细胞划痕的相对愈合速度有抑制作用, 随着浓度的升高抑制作用显著增强. 细胞免疫荧光显示, HCCLM3细胞中丝状伪足增多, 片状伪足减少, 细胞排列更为紧密, 当PPTA浓度为40 μmol/L, 作用显著; Western blot显示, 当PPTA浓度为20、40 μmol/L时, 上调HCCLM3细胞的AKT表达, 下调pAKT表达.

结论

PPTA抑制肝癌细胞HCCLM3的增殖、周期、迁移, 其作用机制可能是调控AKT和ERK相关的信号通路.

Keywords: PPTA; 肝癌; HCCLM3细胞; 增殖; 周期; 迁移

核心提要: 本实验通过四甲基偶氮唑蓝法、流式细胞术、细胞划痕实验、细胞免疫荧光法以及Western blot法等研究发现PPTA明显抑制肝癌细胞HCCLM3的增殖、周期和迁移, 并探讨了其抑制机制可能是调控蛋白激酶B和细胞外信号调节激酶相关的信号通路.