基础研究
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世界华人消化杂志. 2015-10-28; 23(30): 4800-4807
Published online 2015-10-28. doi: 10.11569/wcjd.v23.i30.4800
骨髓间充质干细胞治疗ConA诱导的小鼠急性肝损伤的作用及机制
王丹娜, 郭海英, 刘应莉, 孙朝侠, 徐元富, 刘文天
王丹娜, 郭海英, 刘应莉, 刘文天, 天津医科大学总医院消化科 天津市 300052
孙朝侠, 徐元富, 中国医学科学院血液病医院 天津市 300052
王丹娜, 硕士, 主要从事免疫性肝炎的研究.
作者贡献分布: 此课题由王丹娜、刘文天、郭海英、刘应莉、孙朝侠及徐元富设计; 研究过程由王丹娜、刘文天、郭海英及刘应莉操作完成; 研究所用试剂与工具由孙朝侠与徐元富提供; 数据分析由王丹娜、刘文天及郭海英完成; 本论文写作由王丹娜与刘文天完成.
通讯作者: 刘文天, 教授, 主任医师, 300052, 天津市和平区鞍山西道154号, 天津医科大学总医院消化科. lwentian@sohu.com
电话: 022-60363800
收稿日期: 2015-09-08
修回日期: 2015-10-07
接受日期: 2015-10-12
在线出版日期: 2015-10-28
Abstract

目的: 观察骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMMSCs)在刀豆蛋白A(concanavalin A, ConA)诱导小鼠急性肝损伤中的治疗效果, 并对其可能的治疗机制进行探讨.

方法: 将C57BL/6小鼠的股骨骨髓进行分离、培养、鉴定并体外标记获得BMMSCs; 小鼠尾静脉注射不同浓度ConA, 选择最适剂量建立急性肝损伤模型; 小鼠模型分别经尾静脉注射移植不同剂量(1×105、5×105、1×106、1×107)的氯甲基苯甲酰胺(CM-Dil)标记的BMMSCs, 对照组给予等量磷酸盐缓冲液. 治疗后24 h检测血清样本中谷丙转氨酶(alanine transaminase, ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase, AST)的水平, 酶联免疫吸附分析法检测血清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、干扰素γ(interferon-γ, IFN-γ)及白介素-4(interleukin-4, IL-4)的水平, 取肝脏的病理, 荧光显微镜下观察BMMSCs在肝组织内的定植情况, 并进行肝脏炎症活动度Knodell评分.

结果: 小鼠BMMSCs体外培养及鉴定后符合BMMSCs的特征, CM-DiL体外标记率可达90%以上; 随着ConA注射剂量的增加, 小鼠肝组织损伤严重程度增加, 15 mg/kg是诱导C57BL/6小鼠急性肝损伤的最合适剂量; Ⅱ组、Ⅲ组小鼠血清ALT、AST、TNF-α、IFN-γ、IL-4的水平以及肝脏Knodell评分均明显低于对照组(P<0.05). 肝组织内可见到植入的被标记的BMMSCs, 而在心、脾、肺等重要脏器并未观察到标记的BMMSCs.

结论: BMMSCs可治疗ConA诱导的小鼠急性肝损伤, 其机制可能是通过降低TNF-α、IFN-γ及IL-4而实现.

Keywords: 骨髓间充质干细胞; 刀豆蛋白A; 急性肝损伤; 免疫调节

核心提示: 免疫介导的肝损伤是导致急性肝衰竭、慢性炎症与纤维化的重要机制之一, 寻找一种有效控制免疫性肝炎的新的治疗方法至关重要. 本实验旨在证实骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMMSCs)治疗刀豆蛋白A诱导的急性肝损害的有效性, 并对其可能的机制进行探讨, 为临床上利用BMMSCs的应用提供实验依据.