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世界华人消化杂志. 2010-12-28; 18(36): 3857-3862
Published online 2010-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v18.i36.3857
Published online 2010-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v18.i36.3857
APC/β-catenin/TCF通路在奥曲肽调控结肠癌SW480中的分子机制
王松, 包铮, 龙建武, 李峰, 梁庆模, 南华大学附属南华医院肿瘤外科 湖南省衡阳市 421002
肖忠盛, 南华大学附属第一医院普通外科 湖南省衡阳市 421001
王松, 硕士, 主要从事普外肿瘤防治临床与基础研究.
基金项目: 湖南省自然科学基金资助项目, No. 07JJ6158; 湖南省教育厅基金资助项目, No. 07C631.
作者贡献分布: 此课题由梁庆模与王松设计; 研究过程由王松、包铮、龙建武及肖忠盛完成; 数据分析由王松与李峰完成; 论文书写由王松与梁庆模完成.
通讯作者: 梁庆模, 教授, 主任医师, 421002, 湖南省衡阳市珠晖区东风南路336号, 南华大学附属南华医院肿瘤外科. hylqm@vip.sina.com
电话: 0734-8193128
收稿日期: 2010-09-14
修回日期: 2010-10-22
接受日期: 2010-11-02
在线出版日期: 2010-12-28
修回日期: 2010-10-22
接受日期: 2010-11-02
在线出版日期: 2010-12-28
Abstract
目的: 研究奥曲肽(Octrotide, OCT)对结肠癌SW480细胞中APC/β-catenin/TCF通路各热点分子在mRNA水平和蛋白水平表达量的影响, 初步探讨OCT调控SW480细胞APC/β-catenin/TCF通路的分子靶点.
方法: (1)mRNA检测: 体外培养人结肠癌SW480细胞, 分为对照组和OCT组(10-10 mol/L), 分别提取两组细胞的总RNA, 以RT-PCR法检测APC2、AXIN、CK1α、Cyclin D1、FZD7的mRNA, 筛选出两组细胞5个基因mRNA的表达差异; (2)蛋白检测: 体外培养人结肠癌SW480细胞, 分为对照组和OCT 1、2、3组(10-14、10-12、10-10 mol/L), 分别提取4组细胞的总蛋白, 以Western blot法检测APC2、CK1α、Cyclin D1的蛋白质, 鉴定4组细胞中3个基因在蛋白水平的表达差异.
结果: (1)mRNA检测: OCT组(10-10 mol/L)中APC2、CK1α的mRNA表达上调(均P<0.05), Cyclin D1的mRNA表达下调(P<0.05), AXIN和FZD7的mRNA改变无统计学意义(P>0.05); (2)蛋白检测: OCT 1、2、3组中APC2、CK1α蛋白表达上调(P<0.05), Cyclin D1蛋白表达下调(P<0.05), 且呈浓度依赖性.
结论: OCT通过强化APC2、CK1α"负反馈"调节作用, 下调靶基因Cyclin D1, 负性调控结肠癌SW480中APC/β-catenin/TCF通路.
Keywords: 奥曲肽; SW480细胞; APC/β-catenin/TCF信号通路; APC2; CK1α; Cyclin D1