临床研究
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世界华人消化杂志. 2008-06-18; 16(17): 1866-1872
Published online 2008-06-18. doi: 10.11569/wcjd.v16.i17.1866
食管鳞癌肿瘤相关抗原磷酸甘油酸激酶1的鉴定
高红军, 周兰萍, 毛友生, 王伟, 乔媛媛, 刘芳, 蔡毅然, 赵晓航
高红军, 周兰萍, 刘芳, 赵晓航, 中国医学科学院北京协和医学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室 北京市 100021
毛友生, 中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院胸外科 北京市 100021
王伟, 中国人民解放军海军总医院胸外科 北京市 100037
乔媛媛, 赵晓航, 中国人民解放军海军总医院基础医学研究中心 北京市 100037
蔡毅然, 中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院病理科 北京市 100021
高红军, 博士, 主要从事食管癌功能基因组和蛋白质组学研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30572126, No. 30772507, No. 30721001; 高技术发展计划"863"资助项目, No. 2006AA02Z19B, No. 2006AA02Z341, No. 2006AA02A403; 国家重点基础研究发展计划"973"资助项目, No. 2004CB518707; 教育部博士点专项基金资助项目, No. 20060023010.
作者贡献分布: 主要实验、数据分析和文章起草由高红军完成; 病例选择、样本取材、临床资料整理和细胞培养由周兰萍、毛友生、王伟及乔媛媛完成; 免疫组化分析和评分由刘芳与蔡毅然完成; 课题设计、文章修改和审阅由赵晓航完成.
通讯作者: 赵晓航, 100021, 北京市朝阳区潘家园南里17号, 中国医学科学院北京协和医学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室. zhaoxh@cicams.ac.cn
电话: 010-67709015 传真: 010-87778360
收稿日期: 2008-03-28
修回日期: 2008-05-19
接受日期: 2008-05-30
在线出版日期: 2008-06-18
Abstract

目的: 鉴定新的食管鳞癌肿瘤相关抗原.

方法: 食管癌EC0156细胞总蛋白先经亚组分预分离, 有效富集胞质、胞膜和胞核等组分蛋白; 胞质组分蛋白经SDS-PAGE分离后分别与食管癌患者血清或健康志愿者血清共孵育, 分离血清结合蛋白条带; 胶内酶解阳性蛋白条带, 肽段经色谱分离后用SynaptTM HDMS质谱鉴定. 候选蛋白进一步Western blot经免疫组化验证.

结果: 总蛋白经亚组分分离后, 不同组分蛋白均得到有效富集. 食管癌患者血清能与EC0156细胞胞质蛋白结合, 即选择性识别肿瘤相关抗原. 其中, 43 kDa蛋白条带与食管癌血清(41.4%, 12/29)和对照(3.6%, 1/28)结合阳性率具有明显差异. 从该蛋白条带中共鉴定到磷酸甘油酸激酶、β-actin、蛋白酶体26 s亚基、S-腺苷高半胱氨酸水解酶和磷酸核糖酰氨基咪唑羧化酶5个高可信度蛋白. 磷酸甘油酸激酶(PGK1)定位于胞质和胞核, 在食管癌组织中高表达(69.23%, 18/26).

结论: 改良血清蛋白质组分析策略(mSERPA)可有效分离鉴定肿瘤相关抗原. PGK1是食管癌候选肿瘤相关抗原, 在食管癌发生发展中可能发挥重要作用.

Keywords: 食管鳞癌; 肿瘤相关抗原; 磷酸甘油酸激酶1