基础研究
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世界华人消化杂志. 2007-01-28; 15(3): 221-227
Published online 2007-01-28. doi: 10.11569/wcjd.v15.i3.221
5-Aza-CdR对胃癌细胞系生长及Apaf-1基因异常甲基化的影响
王贺玲, 王学清, 李岩, 孙军
王贺玲, 王学清, 李岩, 孙军, 中国医科大学第二附属医院消化内科 辽宁省沈阳市 110041
王贺玲, 博士研究生, 主要从事胃癌的临床研究.
通讯作者: 李岩, 110004, 辽宁省沈阳市, 中国医科大学第二附属医院消化内科. yanli0227@126.com
收稿日期: 2006-11-09
修回日期: 2006-11-01
接受日期: 2006-11-28
在线出版日期: 2007-01-28
Abstract

目的: 观察5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycitydine, 5-Aza-CdR)对体外培养的胃癌SGC7901细胞和BGC823细胞增生、细胞周期和凋亡的影响及其对此两株细胞中Apaf-1基因的甲基化状态的影响.

方法: 不同浓度5-Aza-CdR处理体外培养的SGC7901细胞和BGC823细胞后, 用MTT法检测处理24, 48和72 h的细胞增殖活性; PI染色和流式细胞仪检测药物处理后72 h细胞周期分布和细胞凋亡率; MSP法检测用药前后细胞中Apaf-1基因的甲基化状态; RT-PCR法及 Western blot法检测用药前后细胞中Apaf-1的mRNA及蛋白表达的变化.

结果: 1×10-7, 5×10-7, 1×10-6和5×10-6 mol/L 5-Aza-CdR处理SGC7901和BGC823细胞24, 48, 72 h后, 细胞增生受到抑制, 有时间和剂量的依赖性. 流式细胞仪分析表明, 各药物浓度处理72 h后凋亡率增加明显: SGC7901细胞5×10-7, 1×10-6和5×10-6 mol/L组分别为2.53%±1.19%, 5.93%±0.86%, 10.14%±1.51%, 与对照组(0.12%±0.03%)相比差异显著(P<0.05); BGC823细胞5×10-7, 1×10-6和5×10-6 mol/L组分别为1.57%±0.26%, 4.64%±1.05%, 8.21%±1.46%, 与对照组(0.57%±0.03%)相比差异显著(P<0.05). 在5-Aza-CdR处理前未检测到SGC7901细胞系及BGC823细胞系的Apaf-1基因的mRNA及蛋白表达, 经过5-Aza-CdR处理后, Apaf-1基因在SGC7901细胞系及BGC823细胞系中甲基化状态得到了逆转, Apaf-1基因的mRNA及蛋白重新表达.

结论: 5-Aza-CdR对SGC7901细胞和BGC823细胞具有增生抑制作用; Apaf-1基因的表达情况与其甲基化状态的改变有关.

Keywords: 5-Aza-CdR; Apaf-1基因; 胃癌; 甲基化; 细胞凋亡; 细胞增殖