基础研究
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世界华人消化杂志. 2006-11-08; 14(31): 3013-3019
Published online 2006-11-08. doi: 10.11569/wcjd.v14.i31.3013
转染VEGF165的大鼠血管内皮细胞与胰岛共移植对糖尿病大鼠的治疗作用
程颖, 刘永锋, 张佳林, 李铁民, 赵宁
程颖, 刘永锋, 张佳林, 李铁民, 赵宁, 中国医科大学附属第一医院器官移植科 辽宁省沈阳市 110001
程颖, 2005年中国医科大学博士, 助理研究员, 主要从事胰岛移植、器官保存方面的研究.
基金项目: 高等学校博士学科点专项科研基金资助项目, No. 20050159010.
通讯作者: 程颖, 110001, 辽宁省沈阳市和平区南京北街155号, 中国医科大学附属第一医院器官移植科. chengying75@sina.com
电话: 024-83282452
收稿日期: 2006-07-03
修回日期: 2006-08-20
接受日期: 2006-09-01
在线出版日期: 2006-11-08
Abstract

目的: 探讨VEGF165转染大鼠血管内皮细胞诱导移植胰岛再血管化及对功能的影响.

方法: 受体糖尿病大鼠随机分为3组, 对照组于肾被膜下移植300当量(1当量相当于1个直径为150 μm的胰岛)胰岛, 转染组和内皮细胞组分别加入1×106转染质粒pIRES2-EGFP/VEGF165的血管内皮细胞和正常血管内皮细胞. 移植后监测血糖及血清胰岛素水平. 术后10 d行静脉糖耐量实验(IVGTT). 术后14 d, 取受者肾脏HE染色及Insulin-6, VEGF和CD34 免疫组化染色, 计算微血管密度.

结果: 实验组大鼠于移植术后3 d血糖及胰岛素水平恢复正常. 对照组和内皮细胞组虽有所改善, 但未恢复到正常水平. IVGTT显示实验组K值(K = 2.69)与正常大鼠相似, 对照组和内皮细胞组K值分别为1.9和1.87, 两组间无明显差异, 而与实验组有明显差异(P<0.05). 实验组大鼠肾被膜下可见成团胰岛, Insulin-6免疫组化呈阳性, 周围及内部有大量内皮细胞. VEGF165免疫组化及CD34免疫组化染色呈阳性. 对照组和内皮细胞组肾被膜下的细胞团中心细胞较少, 部分被纤维组织代替, 内部仅有少量CD34染色阳性的内皮细胞. Insulin-6免疫组化仅有少量细胞染成棕黄色. VEGF165免疫组化呈阴性. 对照组(11.43±2.22)和内皮细胞组MVD(10.9±2.45)无显著差异, 而与实验组间(74.3±6.74)有明显差别(P<0.05).

结论: VEGF165转染大鼠血管内皮细胞可以诱导移植胰岛新生血管生成, 促进再血管化, 降低移植胰岛早期死亡率, 减少供胰用量.

Keywords: 胰岛移植; 再血管化; 血管内皮生长因子165; 基因转染; 血管内皮细胞