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世界华人消化杂志. 2006-11-08; 14(31): 3008-3012
Published online 2006-11-08. doi: 10.11569/wcjd.v14.i31.3008
Published online 2006-11-08. doi: 10.11569/wcjd.v14.i31.3008
暴发性肝衰竭时肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin表达下降
崔巍, 马力, 闻颖, 刘沛, 中国医科大学附属盛京医院感染科 辽宁省沈阳市 110004
崔巍, 讲师, 中国医科大学附属盛京医院感染科博士在读, 主要从事肝脏病的临床和科研工作.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目 , No. 30670947 .
通讯作者: 刘沛, 110004, 辽宁省沈阳市和平区三好街36号, 中国医科大学附属盛京医院感染科. syliupei2003@yahoo.com.cn
电话: 024-83956962 传真: 024-83956451
收稿日期: 2006-08-21
修回日期: 2006-08-30
接受日期: 2006-09-12
在线出版日期: 2006-11-08
修回日期: 2006-08-30
接受日期: 2006-09-12
在线出版日期: 2006-11-08
Abstract
目的: 研究暴发性肝衰竭小鼠大肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin表达的变化.
方法: BALB/c小鼠150只随机分为生理盐水对照组(n = 30)、内毒素(LPS)对照组(n = 30)、D-氨基半乳糖(D-GalN)对照组(n = 30)和暴发性肝衰竭(LPS+GalN)组(n = 60). 采用D-GalN和LPS联合ip制备暴发性肝衰竭小鼠动物模型. 应用免疫组织化学技术、Western blot及实时定量PCR检测暴发性肝衰竭进程中, 小鼠大肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin的定位、表达及mRNA的变化.
结果: occludin蛋白主要沿小鼠大肠黏膜上皮细胞膜的顶端呈线状分布, 在暴发性肝衰竭组小鼠, 6 h时occludin的阳性染色开始减少, 9 h时更为明显. Western blot结果与免疫组织化学结果相一致, 6 h时开始下降(0.48±0.07), 9 h达到最低值(0.36±0.05), 与生理盐水对照组(0.71±0.09)相比差异显著(P<0.05). 实时定量PCR结果显示, 暴发性肝衰竭小鼠2 h时occludin mRNA即开始下降(0.85±0.12), 6 h时达到最低值(0.72±0.04), 与生理盐水对照组(1.00±0.05)相比有明显差异(P<0.05), 9 h时有所恢复(0.93±0.10).
结论: 在暴发性肝衰竭过程中, 大肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin表达下降, 其mRNA也呈下调趋势.
Keywords: 小鼠; 暴发性肝衰竭; 肠黏膜屏障; 紧密连接蛋白; occludin