抗生素诱导SPF级BALB/c小鼠胃肠道白念珠菌定植模型

Abstract

目的: 建立抗生素诱导SPF级BALB/c小鼠胃肠道白念珠菌定植模型.

方法: SPF级♀Balb/c小鼠随机饮用抗生素头孢曲松水溶液5 d(120 h)后, 单次口服灌胃10⁷CFU(50 µL)白念珠菌以诱导其定植. 并运用平板计数和基于细菌16S rDNA的PCR-DGGE技术分析小鼠胃肠道的白色念珠菌定植与微生物区系变化.

结果: 抗生素处理5 d后, 减少了胃肠道99.99%以上的可培养厌氧菌和肠杆菌, 与处理前相比, 有极显著差异(厌氧菌: 8.53±0.31 Log₁₀CFU/g vs 4.18±0.90 Log₁₀CFU/g, P<0.01; 肠杆菌: 3.67±0.14 Log₁₀CFU/g vs 0, P<0.01), 而且DGGE图谱分析显示, 抗生素处理后小鼠细菌微生物区系的多样性明显减少(条带数由27-32条减少到2-7条). 对抗生素处理小鼠单次口服灌胃10⁷CFU白念珠菌2 d后, 在小鼠胃、小肠、盲肠和大肠检测到大量的C. albicans, 数量分别为4.44±0.02 Log₁₀CFU/tissue, 5.05±0.19 Log₁₀CFU/tissue, 5.62±0.06 Log₁₀CFU/tissue, 4.95±0.14 Log₁₀CFU/tissue, 并且单次口服灌胃白念珠菌1 wk后, 小鼠胃肠道内仍维持有4.01±0.06 Log₁₀CFU/g的白念珠菌定植. 与正常Control组和Antibiotic only组相比, Antibiotic+Candida模型组小鼠肠杆菌增殖了10到100倍(3.65±0.16 Log₁₀CFU/g, 3.21±0.18 Log₁₀CFU/g vs 5.42±0.33 Log₁₀CFU/g, P<0.05); 同时DGGE图谱分析显示, Antibiotic+Candida模型组小鼠细菌微生物区系多样性较低(条带数Antibiotic+Candida/22-24条, Control/28-34条和Antibiotic only/27-34条), 各小鼠细菌微生物区系之间的相似性为63.8%-67.0%.

结论: 抗生素处理诱导了胃肠道微生物区系紊乱, 导致了白念珠菌在SPF级Balb/c小鼠胃肠道定植成模.

Keywords: 抗生素; 白念珠菌定植; 微生物区系