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世界华人消化杂志. 2005-08-15; 13(15): 1849-1851
Published online 2005-08-15. doi: 10.11569/wcjd.v13.i15.1849
Published online 2005-08-15. doi: 10.11569/wcjd.v13.i15.1849
小鼠胚胎干细胞体外分步诱导为肝细胞的实验研究
江海洪, 向德栋, 刘国栋, 王宇明, 中国人民解放军第三军医大学西南医院全军感染病研究所 重庆市 400038
江海洪, 男, 1969-03-16生, 重庆市人, 汉族, 2000年第三军医大学硕士, 讲师, 在读博士研究生, 主要从事生物人工肝细胞材料的研究.
通讯作者: 江海洪, 400038, 重庆市, 中国人民解放军第三军医大学西南医院全军感染病研究所. jhh316@hotmail.com
电话: 023-68754475-8017 传真: 023-65461319
收稿日期: 2005-05-23
修回日期: 2005-06-02
接受日期: 2005-06-13
在线出版日期: 2005-08-15
修回日期: 2005-06-02
接受日期: 2005-06-13
在线出版日期: 2005-08-15
Abstract
目的: 探索小鼠胚胎干细胞(ES)体外分步诱导为肝细胞的培养方法.
方法: 在小鼠胚胎成纤维细胞MEF饲养层上培养ES细胞, 培养液中含白血病抑制因子(LIF), 然后分阶段加入含acid-FGF、肝细胞生长因子(HGF)、致瘤素(OSM)、胰岛素、微量硒酸等诱导因子. 采用免疫组化方法检测白蛋白(Albumin)、细胞角蛋白CK18, 用硝基四氮唑蓝/5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸(NBT/BCIP)显色检测碱性磷酸酶(ALP).
结果: ES细胞克隆ALP染色阳性, 未分化. 培养4 d后, 形成拟胚体. 在分步加入诱导因子24 d后, ES细胞分化出的细胞形态比较单一, 类似上皮样细胞. 诱导分化的细胞可见白蛋白、CK18阳性细胞.
结论: 分步诱导培养有利于ES细胞向肝细胞分化.
Keywords: 胚胎干细胞; 肝细胞; 细胞分化