研究快报
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世界华人消化杂志. 2004-09-15; 12(9): 2219-2222
Published online 2004-09-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i9.2219
诱导型一氧化氮合酶基因启动子-969G→C多态性的功能
程元桥, 林菊生, 王文琦, 廖家智, 姜晓丹, 冯玮, 熊平
程元桥, 王文琦, 广东省东莞市人民医院感染科 广东省东莞市 523018
林菊生, 廖家智, 华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科 湖北省武汉市 430030
姜晓丹, 冯玮, 熊平, 华中科技大学同济医学院免疫研究所 湖北省武汉市 430030
通讯作者: 林菊生, 430030, 湖北省武汉市汉口解放大道2239号, 华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所. linjusheng2002@yahoo.com.cn
电话: 027-83662688-3595
收稿日期: 2004-03-05
修回日期: 2004-04-09
接受日期: 2004-04-29
在线出版日期: 2004-09-15
Abstract

目的: 探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因启动子-969G→C多态性的功能意义.

方法: 采用聚合酶链反应(PCR)扩增已知的iNOS基因启动子-969G→C多态性的GC和GG基因型启动子DNA序列, 再采用基因重组技术将获得的启动子与PGVB-2-E荧光素酶载体质粒连接, 构建新的重组质粒pPGV-iNOSmt和pPGV-iNOSwt, 并进行酶切图谱分析和测序分析. 然后将重组质粒分别在脂质体的介导下转染HepG2细胞, 检测荧光素酶的表达水平, 分析不同基因型启动子的活性差异.

结果: 成功构建iNOS基因-969G→C多态性的GC和GG基因型启动子荧光素酶载体重组质粒pPGV-iNOSmt和pPGV-iNOSwt, 发现iNOSmt启动子的活性比对照启动子的活性显著升高, 升高132.1%, 差异有显著性(P <0.05), iNOSwt启动子的活性比对照启动子的活性升高14.3%, 差异无显著性(P >0.05). iNOSmt启动子活性升高的百分率是iNOSwt启动子的9倍.

结论: iNOS基因启动子-969G→C的多态性改变导致该启动子的活性增强.

Keywords: N/A