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反义VEGF寡核苷酸与碘油混合肝动脉注入转染鼠肝癌的可行性
吴汉平, 冯敢生, 华中科技大学同济医学院附属协和医院介入放射科 湖北省武汉市 430022
田元, 华中科技大学同济医学院附属协和医院普外实验室 湖北省武汉市 430022
吴汉平, 男, 1973-05-17生, 湖北省麻城市人, 汉族. 2002年华中科技大学同济医学院博士, 主治医生, 主要从事消化系统疾病的介入治疗及影像诊断, 发表论文6篇.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目 , No. 39770839 .
通讯作者: 冯敢生, 430022, 湖北省武汉市解放大道1277号, 华中科技大学同济医学院附属协和医院介入放射科. shhwhp@public.wh.hb.cn
电话: 027-85726432
收稿日期: 2003-05-14
修回日期: 2003-05-25
接受日期: 2003-06-04
在线出版日期: 2004-01-15
修回日期: 2003-05-25
接受日期: 2003-06-04
在线出版日期: 2004-01-15
Abstract
目的: 探讨反义VEGF寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides, ASODN)转染Walker-256瘤细胞及其与碘油混合后肝动脉注入转染鼠肝癌及在鼠肝、肺、肾组织的分布情况.
方法: 将异硫氰酸荧光素(5'-FITC)标记的VEGF ASODN加入培养的Walker-256瘤细胞培养液中, 不同时间用荧光显微镜观察细胞内ASODN的分布. 12只Walker-256移植性大鼠肝癌模型, 一组肝动脉内注入荧光标记的VEGF ASODN(TAI组, n = 6), 另一组肝动脉内注入荧光标记的VEGF ASODN与超液态碘油的混合液(混合组, n = 6), 两组分别于术后1 d、3 d、6 d取动物的肝、肺、肾组织行冰冻切片, 荧光显微镜观察各组织内ASODN的分布情况.
结果: 荧光标记的ASODN与Walker-256瘤细胞共同培养后2 h时可见瘤细胞胞质内有点状荧光染色, 6 h胞核内有荧光染色, 12 h荧光染色最强, 胞核及胞质中均可见荧光染色, 24 h荧光物质减少, 48 h完全消失. 1 d和3 d时混合组肝癌组织及肝组织内荧光染色强于TAI组, 而肺、肾组织荧光染色弱于TAI组; 6 d时TAI组肝、肺、肾组织内荧光染色基本消失, 而混合组肝、肺、肾组织仍有少许荧光染色. ASODN可以进入肝癌细胞及瘤周肝细胞.
结论: VEGF ASODN可以转染Walker-256细胞, 其与碘油混合后可以延长ASODN在肝内的停留时间, 增加对肝癌组织的转染率, 减少其在肝外组织的分布. 与碘油混合后肝动脉注入是VEGF ASODN反义基因治疗肝癌的理想给药方法.
Keywords: N/A