食管癌
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世界华人消化杂志. 2003-05-15; 11(5): 517-521
Published online 2003-05-15. doi: 10.11569/wcjd.v11.i5.517
腺病毒介导的cox-2反义RNA对食管癌细胞株DNA和蛋白质合成的影响
李胜保, 吴清明, 王强, 王小虎, 谢国建
李胜保, 吴清明, 王强, 王小虎, 谢国建, 郧阳医学院附属太和医院消化内科 湖北省十堰市 442000
李胜保, 男, 1970-09-21生, 湖北省郧县人, 汉族. 1994年郧阳医学院本科毕业, 2001年武汉大学医学院硕士研究生毕业, 主治医师. 主要从事消化道肿瘤的防治.
通讯作者: 李胜保, 442000, 湖北省十堰市人民南路29号, 太和医院消化内科. libao2000@163.com
电话: 0719-8801431
收稿日期: 2002-08-10
修回日期: 2002-08-15
接受日期: 2002-08-23
在线出版日期: 2003-05-15
Abstract
目的

构建表达人cox-2反义RNA的腺病毒载体, 研究其对人食管癌细胞株DNA和蛋白质合成的影响.

方法

把人cox-2的cDNA片段反向克隆于穿梭质粒pHCMVSP1A的CMV启动子之下, 获得pAd-AShcox-2, 通过脂质体与pJM17共转染293细胞, 经同源重组产生编码cox-2反义RNA的重组腺病毒--Ad-AShcox-2. 经PCR的方法鉴定为阳性克隆并大量扩增、纯化, 转染食管癌细胞EC9706, 采用生长细胞计数, 免疫细胞化学、3H-TdR、3H-Leucine掺入法, 研究对食管癌细胞生长、DNA及蛋白质合成的影响.

结果

成功构建并扩增、纯化得到编码cox-2反义RNA的重组腺病毒Ad-AShcox-2, 滴度达0.86×1012 PFU/ml; Ad-AShcox-2感染肿瘤细胞后, cox-2表达水平明显降低, 3H-TdR、3H-Leucine掺入量明显减少, 与对照组在48h、72h、96h比较有显著性差异(q48 h = 16.36及16.36 , q72 h = 39.07及19.90, q96 h= 54.80及30.33; P<0.001); 同时发现食管癌细胞的生长明显受抑制.

结论

表达cox-2反义RNA重组腺病毒感染人食管癌细胞后可降低cox-2表达水平, 使DNA合成降低、蛋白质合成减少, 且抑制食管癌细胞生长、增生, 提示抑制cox-2的表达可能是治疗食管癌的一种新途经.

Keywords: N/A