下调ClC-3通过抑制细胞自噬增强结直肠癌细胞对奥沙利铂化疗敏感性

图1 ClC-3和LC3-Ⅱ在结直肠癌化疗耐药组织和奥沙利铂耐药细胞HT-29/L-OHP中表达情况. A-D: 免疫组化检测癌旁组织(n = 38)、结直肠癌(colorectal cancer, CRC)化疗耐药组织(n = 28)和CRC化疗敏感组织(n = 10)中ClC-3(A、B)和LC3-Ⅱ(C、D)的表达; 与癌旁组织比较, ^aP<0.05; 与化疗敏感组织比较, ^bP<0.05. (E-G)Western blot检测HT-29细胞和HT-29/L-OHP细胞中ClC-3表达(E、F)和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率(E、G); n = 4, 与HT-29细胞比较, ^cP<0.05.

图2 抑制ClC-3表达对结直肠癌细胞奥沙利铂化疗敏感性的影响. A, B: Western blot鉴定HT-29细胞(A)和HT-29/L-OHP细胞(B)的ClC-3 siRNA的转染效率; C: CCK-8法检测不同组细胞活力; n = 4; 与HT-29细胞比较, ^aP<0.05, ^cP<0.05; 与HT-29/L-OHP细胞比较, ^bP<0.05.

图3 抑制ClC-3表达对结直肠癌细胞自噬的影响. A, B: Cyto-ID染色观察不同组中自噬点形成; C-F: Western blot检测不同组中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率(C、D)、Beclin1表达(C、E)和p62表达(C、F); n = 4; 与HT-29+NC siRNA比较, ^bP<0.05; 与HT-29/L-OHP+NC siRNA比较, ^aP<0.05.

图4 促进自噬逆转ClC-3 siRNA对奥沙利铂的增敏效应. A: CCK-8法检测不同组细胞活力; B-F: Western blot检测不同组中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率(B、C)、Beclin1表达(B、D)、p62表达(B、E)和ClC-3表达(B、F); n = 3; 与HT-29+ClC-3 siRNA比较, ^bP<0.05; 与HT-29/L-OHP+ClC-3 siRNA比较, ^aP<0.05.