基础研究
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世界华人消化杂志. 2020-12-28; 28(24): 1235-1242
Published online 2020-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v28.i24.1235
下调ClC-3通过抑制细胞自噬增强结直肠癌细胞对奥沙利铂化疗敏感性
段琼, 陈斌辉, 林义
段琼, 浙江中医药大学药学院 浙江省杭州市 310053
段琼, 陈斌辉, 台州恩泽医疗中心(集团)恩泽医院药剂科 浙江省台州市 317000
段琼, 主管药师, 主要从事肿瘤化疗方面的临床药学与基础药理研究.
林义, 温岭市第一人民医院病理科 浙江省温岭市 317500
作者贡献分布: 此课题由段琼设计; 临床样本收集由段琼与陈斌辉完成; 临床样本检测由林义完成; 细胞实验由段琼完成; 研究所用试剂由段琼提供; 数据分析由段琼与陈斌辉完成; 本论文写作由段琼完成.
通讯作者: 段琼, 主管药师, 317000, 浙江省台州市路桥区桐杨路东1号, 台州恩泽医疗中心(集团)恩泽医院药剂科. duanqiongmed@163.com
收稿日期: 2020-09-23
修回日期: 2020-11-09
接受日期: 2020-11-24
在线出版日期: 2020-12-28
Abstract
背景

电压门控氯通道3(voltage-gated chloride channel 3, ClC-3)可参与调节卵巢癌、宫颈癌和肺癌的化疗敏感性的调节, 而其在结直肠癌(colorectal cancer, CRC)的奥沙利铂化疗中的作用和机制尚不清楚.

目的

探究CRC细胞中ClC-3对奥沙利铂化疗敏感性的影响, 以及细胞自噬在其中发挥的作用.

方法

用免疫组化染色观察ClC-3和微管相关蛋白1Ⅱ轻链3(microtubule-associated protein 1Ⅱ light chain 3, LC3-Ⅱ)在CRC耐药和敏感组织中的表达. 用Western blot检测ClC-3和LC3-Ⅱ在CRC HT-29细胞以及奥沙利铂耐药细胞(HT-29/L-OHP)中的表达. 用ClC-3 siRNA分别转染HT-29细胞和HT-29/L-OHP细胞后, CCK-8法检测细胞对奥沙利铂的敏感性变化; 用Cyto-ID染色观察自噬点形成; 用Western blot检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ和p62的表达. 用自噬激动剂雷帕霉素处理已转染ClC-3 siRNA的HT-29细胞和HT-29/L-OHP细胞后, 用CCK-8法和Western blot分别检测细胞对奥沙利铂的敏感性变化以及Beclin1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、p62和ClC-3蛋白的表达.

结果

CRC耐药组织以及HT-29/L-OHP细胞中LC3Ⅱ和ClC-3均呈现高表达. 抑制ClC-3表达后, HT-29细胞和HT-29/L-OHP细胞对奥沙利铂的敏感性均增加, 细胞的自噬水平降低. 雷帕霉素能逆转抑制ClC-3对CRC细胞对奥沙利铂的增敏效应, 但其对ClC-3的表达无影响.

结论

下调ClC-3可通过抑制细胞自噬来增强CRC细胞对奥沙利铂化疗的敏感性.

Keywords: ClC-3; 细胞自噬; 结直肠癌; 奥沙利铂; 化疗敏感性

核心提要: 下调电压门控氯通道3可通过抑制细胞自噬来发挥增强结直肠癌细胞对奥沙利铂化疗的敏感性.