miR-10b通过抑制KLF4表达诱导胃癌细胞对顺铂耐药

图1 SGC-7901/DDP和MGC-803/DDP细胞的顺铂耐药性鉴定. A、B: 分别用0、10、20、30和40 μmol/L DDP处理细胞24 h后, MTT法检测SGC-7901/DDP(A)和MGC-803/DDP(B)细胞的细胞活力. n = 4, ^bP<0.01 vs SGC-7901细胞; ^dP<0.01 vs MGC-803细胞. DDP: 顺铂.

图2 miR-10b在胃癌顺铂耐药细胞中高表达. A、B: RT-qPCR检测SGC-7901/DDP(A)和MGC-803/DDP(B)细胞中miR-10b表达. n = 4, ^bP<0.01 vs SGC-7901细胞; ^dP<0.01 vs MGC-803细胞. DDP: 顺铂.

图3 过表达miR-10b对顺铂诱导的胃癌细胞活力及凋亡的影响. A: SGC-7901细胞中miR-10b过表达效率鉴定, n = 4, ^bP<0.01 vs NC组; B: MGC-803细胞中miR-10b过表达效率鉴定, n = 4, ^bP<0.01 vs NC组; C: SGC-7901细胞转染miR-NC或miR-10b后, 接着再分别用0、10、20、30和40 μmol/L DDP处理细胞24 h, MTT法检测细胞活力, n = 4, ^bP<0.01 vs NC组; D: MGC-803细胞转染miR-NC或miR-10b后, 接着再分别用0、10、20、30和40 μmol/L DDP处理细胞24 h, MTT法检测细胞活力, n = 4, ^bP<0.01 vs NC组; E-G: SGC-7901和MGC-803细胞转染miR-NC或miR-10b后, 接着再用20 μmol/L DDP处理细胞24 h, Annexin V-FITC/PI染色法检测细胞凋亡(E: 代表性流式细胞散点图; F: SGC-7901细胞凋亡统计结果, n = 4, ^dP<0.01 vs NC+DDP组; G: MGC-803细胞凋亡统计结果, n = 4, ^dP<0.01 vs NC+DDP组). DP: 顺铂; PI: 碘化丙锭; annexin V: 膜联蛋白V.

图4 miR-10b过表达导致SGC-7901细胞移植瘤对顺铂产生耐药性. A: 瘤体的宏观图像; B: 瘤体重量的统计数据, ^bP<0.01 vs NC+DDP组. DDP: 顺铂.

图5 KLF4在胃癌顺铂耐药细胞中表达和miR-10b对KLF4表达的影响. A-C: SGC-7901和SGC-7901/DDP细胞中KLF4的mRNA (A)和蛋白(B和C)的表达水平, n = 4, ^bP<0.01 vs SGC-7901细胞; D-F: MGC-803和MGC-803/DDP细胞中KLF4的mRNA (D)和蛋白(E和F)的表达水平, n = 4, ^dP<0.01 vs MGC-803细胞; G-I: 过表达miR-10b后, SGC-7901细胞中KLF4的mRNA (G)和蛋白(H和I)的表达水平, n = 4, ^fP<0.01 vs NC组; J-L: 过表达miR-10b后, MGC-803细胞中KLF4的mRNA (J)和蛋白(K和L)的表达水平, n = 4, ^fP<0.01 vs NC组. DDP: 顺铂.

图6 上调KLF4的表达可部分逆转miR-10b介导的顺铂耐药. A和B: 三组的SGC-7901细胞中KLF4的蛋白表达水平, n = 4, ^bP<0.01 vs NC+Vector组, ^dP<0.01 vs miR-10b+Vector组; C和D: 三组的MGC-803细胞中KLF4的蛋白表达水平, n = 4, ^bP<0.01 vs NC+Vector组; ^dP<0.01 vs miR-10b+Vector组; E: 三组的SGC-7901细胞的细胞活力, n = 4, ^bP<0.01 vs NC+Vector组; ^cP<0.05 vs miR-10b+Vector组; F: 三组的MGC-803细胞的细胞活力, n = 4, ^bP<0.01 vs NC+Vector组; ^cP<0.05 vs miR-10b+Vector组. DDP: 顺铂.