基础研究
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世界华人消化杂志. 2019-04-28; 27(8): 494-502
Published online 2019-04-28. doi: 10.11569/wcjd.v27.i8.494
miR-181a-5p调控LIF的表达调节胰腺腺泡细胞凋亡的分子机制
龚倩倩, 陈铁江
龚倩倩, 陈铁江, 义乌市中心医院急诊科 浙江省义乌市 322000
龚倩倩, 住院医师, 研究方向急诊.
作者贡献分布: 龚倩倩与陈铁江对此文所作贡献两均等; 此课题由陈铁江设计; 研究过程由龚倩倩操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由陈铁江提供; 数据分析由龚倩倩完成; 本论文写作由龚倩倩完成.
通讯作者: 陈铁江, 副主任医师, 322000, 浙江省义乌市稠江街道崇德路31号, 义乌市中心医院急诊科. 15151821@qq.com
电话: 0579-85209666
收稿日期: 2019-01-18
修回日期: 2019-02-16
接受日期: 2019-03-24
在线出版日期: 2019-04-28
文章亮点
实验背景

miRNA在急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)中的作用已得到认可, 其中miR-181a-5p在AP中的研究甚少, 且miR-181a-5p在AP中的作用机制国内外尚未有人研究.

实验动机

本研究旨在研究miR-181a-5p在氢化可的松诱导的大鼠胰腺腺泡细胞损伤的凋亡情况, 以期望为及时高效治疗AP提供线索.

实验目标

探讨miR-181a-5p调控氢化可的松诱导的大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的作用, 及这种作用的机制, 以期为AP的治疗提供新方向.

实验方法

用15 nmol/L雨蛙素处理大鼠胰腺腺泡细胞AR42J 8 h, 运用ELISA法检测AMY、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)、白介素-6(interleukin-6, IL-6)的表达, 分成Cerulein+anti-miR-con组、Cerulein+anti-miR-181a-5p组、Cerulein+si-con组、Cerulein+si-LIF组, 用流式细胞术、qRT-PCR、Western blot检测细胞的凋亡、miR-181a-5p mRNA和LIF mRNA及LIF、caspase-3蛋白的表达, 双荧光素酶报告基因检测实验验证miR-181a-5p靶向LIF.

实验结果

本研究成功构建雨蛙素诱导的大鼠胰腺腺泡细胞AR42J损伤, 其中miR-181a-5p表达下调, LIF表达上调, 细胞凋亡率上调, 且过表达miR-181a-5p或敲减LIF均可下调细胞的凋亡率, 另外, miR-181a-5p靶向调控LIF.

实验结论

miR-181a-5p可抑制氢化可的松诱导的大鼠胰腺腺泡细胞的凋亡, 其可能与靶向LIF有关, 提示miR-181a-5p可作为AP治疗的潜在作用靶点.

展望前景

本研究仅在体外研究miR-181a-5p对大鼠胰腺细胞损伤的凋亡影响, 后期还需增加miR-181a-5p在胰腺炎大鼠体内是否具有治疗作用, 以更清晰的展示miR-181a-5p对AP的治疗价值, 也为miR-181a-5p的靶向治疗提供更加充分的依据.