Published online 2019-10-28. doi: 10.11569/wcjd.v27.i20.1248
修回日期: 2019-09-23
接受日期: 2019-09-30
在线出版日期: 2019-10-28
胃癌(gastric cancer, GC)是全球常见的恶性肿瘤, 晚期患者预后相对较差, 而进展期GC的治疗多通过手术或联合辅助化疗进行治疗, 目前临床中GC的化疗药物多种多样, 其中多西紫杉醇(docetaxel, DOC)是最常见的化疗药物之一. DOC为新一代紫杉醇类衍生物, 可特异性作用于细胞周期的M期, 通过阻断细胞周期中的M期, 使细胞不能分化, 从而发挥其抗肿瘤作用, 近年来部分研究提示大蒜素(diallyl trisulfide, DATS)可以抑制胃癌细胞(gastric cancer cells, GCC)的增殖, 发生G2/M期阻滞, 因此可以起到抑制细胞增殖的作用. 目前DOC的临床应用受耐药性的限制, 寻找耐药辅助增敏的研究倍受关注, 因此拟通过本课题研究探讨DATS对GCC化疗增敏的分子生物学机制.
本研究拟通过实验研究验证DATS是否可以增加GCC对于化疗药物DOC的敏感性, 明确细胞周期蛋白B1(cyclinB1, CCNB1)是否参与DATS抑制GCC增殖的作用, 为临床肿瘤化疗提供新的思路.
明确DATS抑制GCC增殖的作用机制. 明确DATS是否对DOC对GCC的化疗作用有增敏作用. 明确CCNB1是否参与了DATS 对GCC的化疗敏感作用.
从胃癌系中筛选出CCNB1表达阳性的BGC823 GCC, 然后细胞培养, 选择对数生长的细胞接种于培养瓶随机分成对照组和实验组, 利用流式细胞术、细胞凋亡、细胞周期分析等, 检测细胞周期分布比例变化. 设立空白对照组、加入DATS组、加入DOC组及加入DATS+DOC组, 应用流式细胞术实验方法检测DATS单独或联合DOC后BGC-823的增殖及细胞凋亡情况. 应用蛋白质印迹法检测上述各实验组分别给药后CCNB1的表达情况, 并应用免疫荧光与流式细胞术对比中期阻滞药诺考达唑处理后的BGC823细胞与富集大蒜素(DATS)诱导后的中期BGC823细胞中CCNB1的表达.
DATS可增强DOC对BGC823细胞的化疗敏感性, 且与诱导CCNB1的蛋白的表达增加有关, 为DATS在抑制肿瘤细胞增殖作用及抗癌机制提供理论依据, 且初步验证CCNB1参与DATS抑制肿瘤细胞增殖的作用.
我们研究结果发现, DATS可以明显抑制GCC增殖, 增加DOC的化疗敏感性, 其机制与诱导CCNB1的蛋白表达增加有关.
本研究首次通过实验研究验证DATS可以增加GCC疗药物DOC的敏感性, 初步证实DATS对化疗药物DOC的增敏作用与CCNB1的过表达有关, 后期将继续进一步探讨CCNB1表达调控的分子机制, 为临床表观遗传学干预治疗提供新的理论基础.