基础研究
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世界华人消化杂志. 2019-06-28; 27(12): 742-747
Published online 2019-06-28. doi: 10.11569/wcjd.v27.i12.742
下调miRNA-214表达抑制胃癌SGC-7901/DDP细胞顺铂耐药、迁移和上皮间质转化
朱艳, 刘玮丽, 吴明东, 庄永卫, 叶淑芳, 施旭红
朱艳, 吴明东, 庄永卫, 叶淑芳, 施旭红, 丽水市人民医院全科 浙江省丽水市 323000
朱艳, 副主任医师, 主要从事胃癌基础与临床研究.
刘玮丽, 邵逸夫医院消化内科 浙江省杭州市 310000
基金项目: 丽水市科技计划项目, No. 2015zdxk07.
作者贡献分布: 此课题由刘玮丽设计; 研究过程由朱艳、吴明东、庄永卫及施旭红操作完成; 研究所用试剂及分析工具由刘玮丽及朱艳提供; 数据分析由朱艳及叶淑芳完成; 本论文写作由朱艳及吴明东完成.
通讯作者: 刘玮丽, 副主任医师, 310000, 浙江省杭州市江干区庆春东路3号, 邵逸夫医院消化内科. liuweilillpp23@aliyun.com
电话: 0571-86006186
收稿日期: 2019-04-11
修回日期: 2019-05-14
接受日期: 2019-06-05
在线出版日期: 2019-06-28
文章亮点
实验背景

胃癌(gastric cancer, GC)是常见的消化系统恶性肿瘤之一. 而化疗是治疗GC常规治疗手段之一. 而GC患者化疗容易出现获得性化疗耐药. 因此, 研究逆转GC化疗耐药性的靶点和调控信号机制, 是当今治疗GC急需解决的重要的临床课题.

实验动机

在肿瘤的研究中, 许多miRNAs在调控肿瘤细胞的化疗耐药性中发挥着重要作用. miR-214作为总多miRNAs中的一员, 可以促进多种癌细胞包含GC细胞的增殖、侵袭和迁移, 另外, miR-214还参与调控骨肉瘤细胞、卵巢癌细胞和舌鳞状细胞癌细胞对顺铂耐药性的改变. 尽管miR-214已被证明在多种肿瘤的发生及发展中具有调控功能, 但其对GC顺铂耐药中的具体作用尚不清楚.

实验目标

本研究采用GC顺铂耐药SGC-7901/DDP细胞, 然后通过转染miR-214 inhibitor, 下调miR-214表达后, 观察SGC-7901/DDP细胞迁移、上皮间质转化与顺铂耐药性的变化, 并分析其初步作用机制.

实验方法

SGC-7901/DDP细胞转染miR-214 inhibitor后, 通过CCK8法评估敲低miR-214是否影响细胞对顺铂耐药性; 通过划痕实验评估敲低miR-214是否影响细胞迁移能力; 免疫印迹法评估敲低miR-214是否影响细胞上皮间质转化标志物表达, 以及NF-κB与Bcl-2表达水平.

实验结果

敲低miR-214后, SGC-7901/DDP细胞对顺铂耐药性明显降低; 敲低miR-214后, SGC-7901/DDP细胞迁移能力下降; 敲低miR-214后, SGC-7901/DDP细胞上皮间质转化标志物表达发生了改变, 表现为E-cad蛋白表达显著上升, Vimentin与N-cad蛋白表达显著下降; 同时, 敲低miR-214后, SGC-7901/DDP细胞NF-κB与Bcl-2的表达明显降低.

实验结论

敲低miR-214具有抑制SGC-7901/DDP细胞对顺铂耐药性、细胞迁移与上皮间质转化的作用. 而这种作用可能与下调NF-κB与Bcl-2的表达有关.

展望前景

本研究提示, 下调miR-214能逆转GCSGC-7901/DDP细胞对顺铂的耐药性, 为GC顺铂耐药提供了一定的研究靶点. 本研究下步将先检查临床样本GC耐药组织中miR-214表达, 并采用GC耐药细胞建立GC移植荷瘤鼠在动物实验上检验下调miR-214后, GC顺铂耐药性是否发生逆转.