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下调miRNA-214表达抑制胃癌SGC-7901/DDP细胞顺铂耐药、迁移和上皮间质转化
朱艳, 吴明东, 庄永卫, 叶淑芳, 施旭红, 丽水市人民医院全科 浙江省丽水市 323000
朱艳, 副主任医师, 主要从事胃癌基础与临床研究.
刘玮丽, 邵逸夫医院消化内科 浙江省杭州市 310000
基金项目: 丽水市科技计划项目 , No. 2015zdxk07 .
作者贡献分布: 此课题由刘玮丽设计; 研究过程由朱艳、吴明东、庄永卫及施旭红操作完成; 研究所用试剂及分析工具由刘玮丽及朱艳提供; 数据分析由朱艳及叶淑芳完成; 本论文写作由朱艳及吴明东完成.
通讯作者: 刘玮丽, 副主任医师, 310000, 浙江省杭州市江干区庆春东路3号, 邵逸夫医院消化内科. liuweilillpp23@aliyun.com
电话: 0571-86006186
收稿日期: 2019-04-11
修回日期: 2019-05-14
接受日期: 2019-06-05
在线出版日期: 2019-06-28
修回日期: 2019-05-14
接受日期: 2019-06-05
在线出版日期: 2019-06-28
Abstract
背景
胃癌(gastric cancer, GC)是常见的消化系统肿瘤之一, 而肿瘤化疗耐药是制约GC癌治疗效果的瓶颈, 探索逆转GC化疗耐药机制对于GC的治疗具有重大意义.
目的
探讨敲低miR-214表达对GC细胞SGC-7901/DDP顺铂耐药性、迁移以及上皮间质转化(epithelial mesenchymal transformation, EMT)的影响, 并讨论初步作用机制.
方法
采用LipofectamineTM2000法转染miR-214 inhibitor至SGC-7901/DDP细胞后, CCK-8法评估细胞对顺铂耐药性的改变; 划痕试验检测细胞迁移能力; 免疫印迹法检测细胞中E-钙黏蛋白(E-cad)、波形蛋白(Vimentin)和N-钙黏蛋白(N-cad), 以及NF-κB与Bcl-2蛋白表达水平.
结果
转染miR-214 inhibitor后, SGC-7901/DDP细胞对顺铂耐药性明显降低(P<0.05); 且细胞迁移能力明显降低(P<0.05), E-cad蛋白表达显著升高(P<0.05), Vimentin与N-cad蛋白表达均显著降低(均P<0.05). 另外, SGC-7901/DDP细胞中NF-κB与Bcl-2的表达明显降低(均P<0.05).
结论
下调miR-214表达具有降低GCSGC-7901/DDP细胞对顺铂耐药性, 抑制细胞迁移与EMT的作用. 而这种作用可能与下调NF-κB与Bcl-2的表达有关.
Keywords: miR-214; 胃癌; 上皮间质转化; 顺铂耐药
核心提要: 铂类药物为主的化疗是治疗胃癌的常用手段之一, 而化疗耐药制约着化疗的最终疗效. 本研究发现, 下调SGC-7901/DDP细胞miR-214表达后, 顺铂耐药性、细胞迁移与上皮间质转化均降低; 同时, NF-κB与Bcl-2的表达也明显降低.