基础研究
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世界华人消化杂志. 2020-12-28; 28(24): 1229-1234
Published online 2020-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v28.i24.1229
胃食管反流病患者CYP2C19基因启动子的遗传变异和功能分析
王珏磊, 南寿山, 王柏清, 王超, 李朝霞, 窦广仙, 孙光斌
王珏磊, 南寿山, 王柏清, 王超, 李朝霞, 窦广仙, 孙光斌, 天津市第五中心医院消化内科 天津市 300450
王珏磊, 住院医师, 2013年解放军总医院硕士, 主要从事胃食管反流病的诊断与治疗方面的工作.
基金项目: 天津市滨海新区卫生和计划生育委员会科技项目, No. 2018BWKY025.
作者贡献分布: 此课题由王珏磊与孙光斌设计; 研究过程由王珏磊、王柏清、王超及李朝霞操作完成; 研究所用试剂由窦广仙提供; 数据分析由王珏磊与南寿山完成; 本论文写作由王珏磊完成.
通讯作者: 孙光斌, 主任医师, 天津市滨海新区浙江路41号, 天津市第五中心医院消化内科. sun19660901@sina.com
收稿日期: 2020-08-25
修回日期: 2020-10-14
接受日期: 2020-11-24
在线出版日期: 2020-12-28
Abstract
背景

胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease, GERD)是一种慢性疾病, 其发病率在世界范围内呈上升趋势. 质子泵抑制剂(proton pump inhibitors, PPIs) 作为抑酸药物, 在临床上常用于治疗GERD, 经肝脏中CYP2C19代谢后, 血药浓度逐渐降低. 先前的研究已证明CYP2C19基因多态性导致PPIs在代谢速率、半衰期和药效等方面个体差异大, 影响疗效.

目的

筛选正常代谢型(*1/*1)的GERD患者CYP2C19基因启动子区的变异, 并在细胞水平验证基因变异对启动子功能的影响, 进而分析CYP2C19启动子区功能改变与GERD经PPIs治疗效果的相关性.

方法

收集入院治疗的散发性GERD患者全血163例, 实验组患者经 PPIs诊断性治疗后, 症状积分降低>50%, 症状未完全消失(n = 82); 对照组患者治疗后症状完全消失(n = 81); 全部患者CYP2C19基因型经检测为*1/*1. 利用PCR扩增并结合Sanger测序筛选入组患者CYP2C19启动子区的基因变异; 将CYP2C19启动子片段(野生型/变异型)克隆至pGL3 basic载体, 并转染HEK 293T细胞, 通过双荧光素酶报告基因系统, 检测基因变异对启动子功能的影响.

结果

我们在3个正常代谢型GERD患者的CYP2C19基因启动子中分别发现了3个新的杂合变异: g.94761364 T>A, g.94762112 T>A, g.94762514 G>T; 与野生型相比, 携带g.94761364 T>A变异的CYP2C19启动子的转录活性显著升高(P = 0.034).

结论

变异位点g.94761364 T>A使得CYP2C19启动子转录活性在细胞水平升高, 可能会进一步影响PPIs的代谢和血药浓度, 这一发现为中国人群中GERD患者的临床用药和治疗提供了新的思路.

Keywords: 胃食管反流病; CYP2C19启动子; 基因变异; 质子泵抑制剂

核心提要: 本研究在3例正常代谢型胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease, GERD)患者的CYP2C19基因启动子区发现的3个基因变异, 均在细胞水平下调了CYP2C19启动子转录活性, 可能进一步影响质子泵抑制剂的代谢和治疗效果, 这一发现为中国人群中GERD患者的临床用药和治疗提供了新的思路.