基础研究
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世界华人消化杂志. 2018-04-18; 26(11): 648-654
Published online 2018-04-18. doi: 10.11569/wcjd.v26.i11.648
RNA干扰Gal-3表达抑制胰腺癌细胞增殖并促进其凋亡
刘治智, 方从诚, 黄美君
刘治智, 黄美君, 浙江省台州市恩泽医疗中心(集团)路桥医院消化内科 浙江省台州市 318050
刘治智, 主治医师, 研究方向为消化系统方面疾病.
方从诚, 浙江省台州市恩泽医疗中心(集团)台州医院消化内科 浙江省台州市 318050
基金项目: 浙江省医药卫生科技计划项目, No. 2016KYA191.
作者贡献分布: 此课题由方从诚负责; 研究过程、数据分析由方从诚与刘治智操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由方从诚提供; 本文写作有刘治智、黄美君及方从诚完成.
通讯作者: 黄美君, 主任医师, 318050, 浙江省台州路桥桐屿立新村桐阳路东1号,浙江省台州市恩泽医疗中心(集团)恩泽医院消化内科. fiechenf@163.com
电话: 0576-82518538
收稿日期: 2018-01-26
修回日期: 2018-03-28
接受日期: 2018-04-04
在线出版日期: 2018-04-18
Abstract
目的

探讨RNA干扰半乳糖凝集素-3(galectin-3, Gal-3)表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制.

方法

将培养的Panc-1细胞随机分为对照组(未处理)、NC组(转染control-siRNA)和Gal-3干扰组(转染Gal-3-siRNA), 以小干扰RNA(Small interfering RNA, siRNA)技术干扰Panc-1细胞中Gal-3表达后, RT-PCR和Western blot检测干扰效果, CCK-8法检测细胞增殖, 流式细胞仪检测细胞凋亡, Western blot检测细胞中ki67、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶 3(Cleaved caspase-3)抗体和β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达.

结果

与对照组相比, NC组中Gal-3 mRNA(0.99±0.08 vs 1.01±0.06)和蛋白(0.36±0.03 vs 0.34±0.05)的表达差异不显著(P>0.05), 而Gal-3干扰组中Gal-3 mRNA(0.38±0.02 vs 1.01±0.06)和蛋白(0.10±0.01 vs 0.34±0.05)的表达均显著降低(P<0.05); Gal-3干扰组细胞增殖能力减弱(24 h: 0.55±0.03 vs 0.71±0.05; 48 h: 0.76±0.05 vs 0.97±0.06; 72 h: 1.08±0.06 vs 1.32±0.09), G0/G1期细胞百分比升高(79.48±1.32 vs 71.52±1.15 ), S期(14.26±1.08 vs 18.24±1.06)和G2/M期(6.21±0.78 vs 10.19±1.52)降低, 凋亡能力增强(13.26±2.28 vs 5.82±0.35), 与对照组相比, 差异均有统计学意义(P<0.05); 与对照组相比, Gal-3干扰组中ki67(0.24±0.02 vs 0.96±0.07)、CyclinD1(0.26±0.03 vs 0.88±0.09)和β-catenin(0.42±0.05 vs 0.87±0.05)蛋白的表达水平均明显降低, 而Cleaved Caspase-3(0.70±0.06 vs 0.32±0.03)蛋白表达水平明显升高, 差异有统计学意义(P<0.05); NC组与对照组间各指标差异均无统计学意义(P>0.05).

结论

RNA干扰Panc-1细胞中Gal-3表达, 可抑制细胞增殖并促进细胞凋亡, 其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关.

Keywords: 胰腺癌; 半乳糖凝集素-3; 增殖; 凋亡

核心提要: 半乳糖凝集素-3(galectin-3, Gal-3)表达可促进胰腺癌Panc-1细胞增殖, 小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)技术干扰其表达可抑制Panc-1细胞增殖, 诱导细胞凋亡, 并阻滞细胞于G0/G1期. Gal-3有望成为治疗胰腺癌的新靶点.