基础研究
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世界华人消化杂志. 2016-03-28; 24(9): 1342-1348
Published online 2016-03-28. doi: 10.11569/wcjd.v24.i9.1342
RNA干扰阻断CXCR4基因对胰腺癌AsPC-1细胞侵袭转移的影响
黄继英, 高振军, 沈曼茹, 孟鑫
黄继英, 高振军, 沈曼茹, 复旦大学附属中山医院青浦分院消化科 上海市 201700
孟鑫, 复旦大学附属中山医院青浦分院医院感染管理科 上海市 201700
黄继英, 副主任医师, 主要从事胰腺炎及胰腺肿瘤的基础和临床研究.
基金项目: 上海市卫生和计划生育委员会基金资助项目, No. 201440607; 上海市青浦区卫生和计划生育委员会基金资助项目, No. W2014-01.
作者贡献分布: 此课题由高振军、黄继英及孟鑫设计; 研究过程由高振军与黄继英完成; 数据分析由高振军、孟鑫及沈曼茹完成; 论文写作由高振军与黄继英完成.
通讯作者: 孟鑫, 副主任护师, 201700, 上海市青浦区公园东路1158号, 复旦大学附属中山医院青浦分院医院感染管理科. hjy403@163.com
电话: 021-69719190
收稿日期: 2015-12-13
修回日期: 2016-01-27
接受日期: 2016-02-18
在线出版日期: 2016-03-28
Abstract

目的: 观察针对CXCR4基因慢病毒Lentiviral(LV)介导的RNAi转染胰腺癌细胞株AsPC-1后细胞增殖、迁移、侵袭的影响, 探讨可能机制.

方法: 人CXCR4基因干扰靶点设计后成功转染人胰腺癌细胞系AsPC-1细胞, 然后分为转染组(LV-siCXCR4-1)、阴性对照组(AsPC-1-LV-con)和空白对照组(AsPC-1细胞), 实验组加入基质细胞衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-1α, SDF-1α), MTT法检测细胞增殖, 迁移实验检测细胞迁移, Transwell检测细胞的体外侵袭, Western blot检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、基质蛋白金属酶(matrix metalloproteinases, MMP)2和MMP9的表达.

结果: 在SFM或10%NCS培养条件下, SDF-1α均可刺激AsPC-1细胞、AsPC-1-LV-Con细胞增殖(P<0.01), 对LV-siCXCR4-1增殖均无明显促进作用; SDF-1α可促进AsPC-1、AsPC-1-LV-Con细胞迁移和侵袭(P<0.01), 对LV-siCXCR4-1无明显促进作用; 在SDF-1α作用下, LV-siCXCR4-1细胞的MMP9及VEGF的蛋白表达低于AsPC-1、AsPC-1-LV-Con细胞(P<0.01).

结论: CXCR4基因RNAi可显著抑制SDF-1α引起的AsPC-1细胞的增殖、体外迁移和侵袭, 进一步证实SDF-1/CXCR4受体配体系统参与了胰腺癌的增殖、侵袭及转移, 通过RNAi技术可抑制胰腺癌细胞的增殖、侵袭及转移.

Keywords: 胰腺肿瘤; 基质细胞衍生因子-1; 受体; CXCR4; RNA干扰

核心提示: 间质细胞衍生因子(stromal cell-derived factor 1, SDF-1)/CXCR4轴在胰腺肿瘤细胞的播散和转移中起重要作用, 因此阻断SDF-1/CXCR4可能是预防肿瘤转移的一种策略, 而应用LV介导的RNAi可能是实现这个策略的一个途径.