基础研究
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世界华人消化杂志. 2016-03-08; 24(7): 1017-1023
Published online 2016-03-08. doi: 10.11569/wcjd.v24.i7.1017
健脾补肾、清肠化湿方联合BMSCs对溃疡性结肠炎模型大鼠肠屏障的修复作用
朱磊, 沈洪, 顾培青, 刘丽, 张露, 成家飞, 朱长乐, 司海鹏
朱磊, 张露, 江苏省中医院基地办 江苏省南京市 210029
沈洪, 顾培青, 成家飞, 江苏省中医院消化科 江苏省南京市 210029
刘丽, 江苏省中医院科技处 江苏省南京市 210029
朱长乐, 司海鹏, 江苏省中医院病理科 江苏省南京市 210029
朱磊, 主治中医师, 从事消化系统疾病的中西医结合治疗及机制研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81373606; 国家中医药行业科研专项基金资助项目, No. 201407001; 江苏省临床医学科技专项基金资助项目, No. BL2014100.
作者贡献分布: 课题实施、数据分析和论文写作由朱磊完成; 顾培青、张露、成家飞、朱长乐及司海鹏协助实施; 刘丽实验技术指导; 沈洪课题设计、指导与审校.
通讯作者: 沈洪, 教授, 主任中医师, 210029, 江苏省南京市汉中路155号, 江苏省中医院消化科. shenhong999@163.com
电话: 025-86617141-91601
收稿日期: 2015-12-31
修回日期: 2016-01-18
接受日期: 2016-01-25
在线出版日期: 2016-03-08
Abstract

目的: 观察健脾补肾、清肠化湿方联合骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells, BMSCs)对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠黏膜的修复作用.

方法: SD大鼠随机分为空白组、模型组、BMSCs组、干预BMSCs组和联合组. TNBS法建立溃疡性结肠炎大鼠模型, 空白组、模型组大鼠尾静脉分别注射1 mL生理盐水, BMSCs组大鼠尾静脉注射BMSCs, 干预BMSCs和联合组大鼠分别注射体外中药共培养的BMSCs, 联合组再予中药13.6 g/kg灌胃10 d. 分别于第5天和第10天每组各处死5只大鼠, 留取标本. 电子显微镜观察大鼠结肠组织杯状细胞数量, 实时定量PCR检测(real-time quantitative PCR, qRT-PCR)和Western blot法分别检测大鼠结肠组织Muc2 mRNA和蛋白的表达, Western blot法检测Muc2相关因子Math1和KLF-4蛋白的表达.

结果: 与模型组相比, 各治疗组肠黏膜杯状细胞数量增多, 各治疗组Muc2 mRNA水平升高, 联合组优于干预BMSCs组和BMSCs组(P<0.05). 随着时间延长, 治疗效果越明显. 治疗第10天, 与正常组相比, 模型组Muc2、Math1和KLF-4蛋白表达量明显下降, 经治疗后, 各治疗组蛋白表达量均上高, 联合组升高最明显.

结论: 静脉移植BMSCs的同时给予健脾补肾、清肠化湿方能提高黏蛋白Muc2表达水平, 增多杯状细胞数量, 修复肠屏障, 联合灌胃持续给药效果更佳, 其机制可能和提高Math1和KLF-4因子表达有关.

Keywords: 溃疡性结肠炎; 健脾补肾清肠化湿方; 间充质干细胞; 黏液屏障

核心提示: 目前认为溃疡性结肠炎发病主要是环境作用于遗传易感者, 在肠道菌群参与下启动了肠道免疫和非免疫系统, 导致免疫炎症反应, 肠黏膜屏障遭到破坏. 骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells, BMSCs)移植治疗已成为研究热点. 本研究初步探索中药联合BMSCs移植从而促进肠黏膜屏障的修复作用及其可能机制.