基础研究
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世界华人消化杂志. 2016-02-18; 24(5): 678-685
Published online 2016-02-18. doi: 10.11569/wcjd.v24.i5.678
肠道碱性磷酸酶对结肠炎小鼠Muc2、Stat4及P-Stat4表达的影响
马娜, 赵美华, 李林静, 李展, 周力为, 冯百岁
马娜, 赵美华, 李林静, 李展, 周力为, 冯百岁, 郑州大学第一附属医院消化内科 河南省郑州市 450052
马娜, 主要从事炎症性疾病的基础和临床研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, Nos. 81070288, 81270452; 河南省医学科技攻关计划基金资助项目, No. 201001004; 河南省医学科技学术带头人出国培训计划基金资助项目, No. 201201013.
作者贡献分布: 此课题由马娜与冯百岁设计; 研究过程由马娜、赵美华及李林静完成; 数据分析由马娜、李展及周力为完成; 文章由马娜撰写; 由冯百岁指导论文修改.
通讯作者: 冯百岁, 教授, 主任医师, 博士生导师, 450052, 河南省郑州市二七区建设东路1号, 郑州大学第一附属医院消化内科. fbs163@163.com
收稿日期: 2015-11-11
修回日期: 2015-12-21
接受日期: 2016-01-11
在线出版日期: 2016-02-18
Abstract

目的: 探讨肠道碱性磷酸酶(intestine alkaline phosphatase, IAP)对2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitro-benzenesulfonic acid, TNBS)诱导的小鼠结肠炎中Muc2、Stat4和磷酸化Stat4(P-Stat4)表达的影响.

方法: 以对TNBS敏感的45只Balb/C小鼠为研究对象, 随机分为3组. 分别给予对照组(control)、模型组(TNBS)和治疗组(TNBS/IAP)生理盐水灌肠、TNBS灌肠加生理盐水灌胃和TNBS灌肠加IAP灌胃. 于1 wk后评估小鼠肠道炎症情况, 用HE染色检测肠道病理改变, 免疫组织化学染色检测小鼠肠道上皮中Muc2、Stat4和P-Stat4的表达情况. 用不同浓度的IAP预处理DC2.4细胞系, 用蛋白免疫印迹试验检测LPS诱导后细胞中Stat4和P-Stat4的表达.

结果: 与对照组比较, 模型组小鼠结肠炎症明显, 而治疗组较模型组改善. 在小鼠结肠上皮中, Muc2染色阳性率在3组间有差异(χ2 = 19.62, P<0.05); 模型组低于对照组(13.33% vs 93.33%)(χ2 = 19.29, P<0.05); 治疗组高于模型组(60.00% vs 13.33%)(χ2 = 7.033, P<0.05). Stat4染色阳性率在3组间有差异(χ2 = 7.22, P<0.05); 模型组高于对照组(66.67% vs 20.00%)(χ2 = 6.652, P<0.05); 治疗组和模型组(50.00% vs 66.67%)之间的差异无统计学意义(χ2 = 3.333, P>0.05). P-Stat4染色阳性率在3组间有差异(χ2 = 12.95, P<0.05); 模型组高于对照组(60.00% vs 6.67%)(χ2 = 9.6, P<0.05);治疗组低于模型组(13.33% vs 60.00%)(χ2 = 7.033, P<0.05). 20、100 IU/mL的IAP处理DC2.4后, Stat4和P-Stat4的表达下调(P<0.05).

结论: IAP促进结肠炎小鼠肠道Muc2的表达, 下调Stat4的磷酸化, 可缓解TNBS诱导的小鼠结肠炎.

Keywords: 炎症性肠病; 结肠炎; 肠道碱性磷酸酶; Muc2; Stat4

核心提示: Muc2与炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)发病有关, 而碱性磷酸酶(intestine alkaline phosphatase, IAP)可抑制Stat4的磷酸化和上调Muc2表达, 缓解结肠炎. 因此, 补充IAP有望成为IBD治疗的新方法, 且IAP的检测可能为临床IBD的诊断提供参考.