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世界华人消化杂志. 2016-05-08; 24(13): 2038-2044
Published online 2016-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v24.i13.2038
Published online 2016-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v24.i13.2038
GM-CSF浓度梯度对树突状细胞体外诱导培养的影响
谢楠, 张理超, 付必莽, 唐波, 李春满, 赵越, 胡明道, 张捷, 昆明医科大学第二附属医院肝胆胰外科一病区 云南省昆明市 650101
谢楠, 主要从事肝胆胰疾病的研究.
基金项目: 教育部博士点新教师基金资助项目, No. 20105317120002; 2010年度云南省自然科学基金资助项目, No. 2010ZC127.
作者贡献分布: 此课题由付必莽负责; 付必莽与张捷指导; 付必莽进行文献检索及实验设计; 实验操作及数据采集由张理超、唐波、李春满、赵越、胡明道及谢楠共同完成; 数据分析及论文撰写由付必莽与谢楠完成; 实验指导及论文修改由付必莽完成.
通讯作者: 付必莽, 教授 , 硕士生导师, 650101, 云南省昆明市滇缅大道374号, 昆明医科大学第二附属医院肝胆胰外科一病区. fubimang@126.com
收稿日期: 2016-03-08
修回日期: 2016-03-30
接受日期: 2016-04-05
在线出版日期: 2016-05-08
修回日期: 2016-03-30
接受日期: 2016-04-05
在线出版日期: 2016-05-08
Abstract
目的: 观察不同浓度粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, GM-CSF)联合白介素4(interleukin, IL-4)对小鼠骨髓源性树突状细胞(dendritic cell, DC)形态、纯度、细胞数目的影响, 探究树突状细胞诱导培养的最适宜条件.
方法: 分离、纯化小鼠骨髓单个核样细胞, 分别加入不同浓度梯度的GM-CSF和定量的IL-4, 对其进行形态学观察和细胞表型检测, 以及对异基因淋巴细胞的激活作用测定.
结果: 在一定浓度范围内, 随着GM-CSF浓度的增加, 小鼠骨髓源性树突状细胞的数目、纯度及成熟度亦随之增加. 而过高浓度的GM-CSF反而导致抑制作用. 据此, 可推测理想的GM-CSF浓度范围应为10-20 ng/mL.
结论: 适宜浓度的GM-CSF联合IL-4可提升小鼠骨髓单个核样细胞向树突状细胞分化的能力, 两种细胞刺激因子的合理运用, 可增加树突状细胞的数目、纯度及成熟度.
Keywords: 树突状细胞; 体外培养; 粒-巨噬细胞集落刺激因子; 白介素-4
核心提示: 本实验对粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, GM-CSF)最适宜浓度范围做了初步探究, 用实验证明了其最适宜浓度, 为后续的树突状细胞(dendritic cell, DC)研究奠定了坚实的基础, 同样是肿瘤免疫、器官移植免疫等多种疾病研究中需要用到的相关DC培养诱导方式, 也阐明了GM-CSF的双重诱导结果.