基础研究
Copyright ©The Author(s) 2015. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2015-03-08; 23(7): 1052-1058
Published online 2015-03-08. doi: 10.11569/wcjd.v23.i7.1052
去甲肾上腺素对肝星状细胞表达瘦素以及瘦素受体的影响
刘娜, 穆华, 梁传栋, 郑吉敏, 张建
刘娜, 穆华, 郑吉敏, 张建, 河北省人民医院消化内科 河北省石家庄市 050051
梁传栋, 河北省人民医院功能神经外科 河北省石家庄市 050051
刘娜, 主治医师, 主要从事慢性肝病的研究.
基金项目： 河北省卫生厅基金资助项目, No. ZL20140250.
作者贡献分布: 课题设计以及论文撰写由刘娜完成; 细胞培养以及购买试剂由穆华完成; Western blot、免疫组织化学实验、Real-time RCR实验由梁传栋与张建完成; 数据分析及统计由郑吉敏完成.
通讯作者: 刘娜, 主治医师, 050051, 河北省石家庄市和平西路348号, 河北省人民医院消化内科. 1093961170@qq.com
电话: 0311-85989910
收稿日期: 2014-12-16
修回日期: 2015-01-12
接受日期: 2015-01-15
在线出版日期: 2015-03-08
Abstract

目的: 探讨交感神经递质去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)对体外培养肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSC)系表达瘦素以及瘦素受体的影响.

方法: 用不同浓度的NE作用于HSC, 分别于24、48及72 h收集细胞, 免疫组织化学方法检测活化HSC表达α-肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)情况; Western blot法检测其表达瘦素以及瘦素受体蛋白的影响; real-time PCR检测NE对HSC瘦素以及瘦素受体mRNA的影响.

结果: (1)免疫组织化学结果显示, 1、10、100 μmol/L浓度NE作用于HSC 24 h, α-SMA表达明显增加(14.1±4.4, 17.5±5.2, 19.8±4.1 vs 11.3±4.5; P<0.05); 提示NE可以活化HSC, 并促进HSC增殖. 10 μmol/L NE作用HSC 24、48、72 h后, α-SMA表达逐渐增强(17.5±5.2; 18.5±5.4; 19.2±6.2, P<0.05); 提示NE对HSC的促增殖作用具有时间依赖性; (2)Western blot结果显示, 1、10、100 μmol/L NE作用于HSC 24 h后, 瘦素蛋白表达明显高于对照组(1.54±0.08, 2.72±0.09, 2.84±0.18 vs 0.85±0.12, P<0.05); 瘦素受体蛋白表达亦明显高于对照组(1.57±0.18, 2.51±0.17, 2.89±0.19 vs 0.98±0.15, P<0.05); (3)Real-time PCR检测HSC瘦素以及瘦素受体mRNA的表达增加, 1、10、100 μmol/L NE作用于HSC 24 h后, 瘦素mRNA表达明显高于对照组(1.51±0.08, 2.58±0.09, 3.63±0.12 vs 1.00±0.07, P<0.05); 瘦素受体mRNA表达亦明显高于对照组(1.71±0.08, 2.87±0.10, 4.01±0.14 vs 1.00±0.08, P<0.05).

结论: 交感神经递质NE对体外活化的HSC瘦素以及瘦素受体的表达均有促进作用, 从而参与了肝纤维化的进程.

Keywords: 肝星状细胞; 肝纤维化; 去甲肾上腺素; 瘦素; 可溶性瘦素受体

核心提示: 本研究首次检测了交感神经递质去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)对肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSC)瘦素以及瘦素受体表达的影响. 结果证实NE作用于HSC之后, 瘦素以及可溶性瘦素受体蛋白以及mRNA表达均明显增高, 提示NE确实介导了HSC瘦素以及瘦素受体的表达, 从而参与了肝纤维化的过程.