修回日期: 2014-12-28
接受日期: 2015-01-04
在线出版日期: 2015-02-28
目的: 探讨硫化氢(hydrogen sulfide, H2S)对肝纤维化大鼠肝细胞增殖、凋亡的调节作用以及P-p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase, p38MAPK)蛋白的表达的影响.
方法: 用四氯化碳诱导肝纤维化SD大鼠模型, 将提取的肝纤维化大鼠肝细胞分组: 对照组、H2S组(对照组基础上加H2S的供体NaHS至最适浓度)、SB组(对照组基础上加SB203580至最适浓度)、SB+H2S组(对照组基础上加NaHS、SB203580至最适浓度). MTT法检测NaHS及SB203580对肝纤维化大鼠肝细胞的增殖、增殖抑制率的影响; Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测肝纤维化大鼠肝细胞凋亡率; Western blot技术检测P-p38MAPK蛋白在各组中的表达水平.
结果: 与对照组相比, 低浓度H2S(50 μmol/L)促进肝纤维化大鼠肝细胞增殖明显(P = 0.000), 对肝纤维化大鼠肝细胞凋亡无影响; SB203580可抑制肝纤维化大鼠肝细胞的增殖, 伴随药物浓度的升高细胞存活率降低(P = 0.000), 并诱导肝纤维化大鼠肝细胞凋亡(P = 0.000); P-p38MAPK蛋白在各组中均有表达, H2S组表达水平高于对照组(P = 0.000), SB组、SB+H2S组与对照组、H2S组相比, P-p38MAPK蛋白的表达量均减少(均P = 0.000).
结论: 低浓度H2S对肝纤维化大鼠肝细胞凋亡无诱导作用, 但能通过激活p38MAPK信号转导通路促进其细胞增殖.
核心提示: 肝细胞作为肝脏的主体细胞, 其增生不良是导致肝纤维化的重要机制之一. 本实验拟通过四氯化碳诱导肝纤维化的发生, 用提取的原代肝细胞研究硫化氢(hydrogen sulfide)对肝纤维化肝细胞增殖、凋亡的调节作用, 为肝纤维化的治疗提供理论基础.