基础研究
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世界华人消化杂志. 2015-01-28; 23(3): 363-372
Published online 2015-01-28. doi: 10.11569/wcjd.v23.i3.363
结肠癌干细胞的肿瘤形成特征及其临床价值
邓超, 陈豪, 金黑鹰, 王水明
邓超, 陈豪, 南京中医药大学第一临床学院 江苏省南京市 210068
金黑鹰, 王水明, 南京中医药大学第三附属医院 南京市中医院肛肠科六病区 全国肛肠医疗中心 江苏省中西医结合结直肠癌诊疗中心 江苏省南京市 210001
邓超, 主要从事中西医结合肛肠病学的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, Nos. 30973837, 81273944.
作者贡献分布: 本文由邓超撰写完成; 金黑鹰审校; 陈豪与王水明实验设计及收集整理资料.
通讯作者: 金黑鹰, 主任医师, 博士生导师, 210001, 江苏省南京市秦淮区金陵路1号, 南京中医药大学第三附属医院, 南京市中医院肛肠科六病区, 全国肛肠医疗中心, 江苏省中西医结合结直肠癌诊疗中心. jinheiying@hotmail.com
电话: 025-52276200
收稿日期: 2014-11-25
修回日期: 2014-12-14
接受日期: 2014-12-18
在线出版日期: 2015-01-28
Abstract

目的: 研究结肠癌干细胞的肿瘤形成价值及其可能的临床价值.

方法: 对结肠癌干细胞进行无血清培养, 以流式细胞仪检测CD133和CD44表达, 以5-氟尿嘧啶(5-flurouracil, 5-Fu)处理结肠癌干细胞并观察其增殖抑制, 对结肠癌干细胞进行动物实验以确定其成瘤特征.

结果: Hoechest33342染色后, HT-29干细胞相对于HT-29细胞有明显的核拒染现象; 流式细胞仪发现HT-29细胞CD133阳性表达比率为44.6%, CD44阳性表达比率为0.6%; 而经过培养提纯后的HT-29干细胞CD133阳性表达比率为92.6%, CD44阳性表达比率为97.8%, CD133与CD44阳性表达比率显著提高; HT-29干细胞相对于HT-29细胞对5-Fu有明显的耐药作用, HT-29细胞IC50值为1.394 µg/mL, HT-29干细胞的IC50值为13.087 µg/mL, IC50值有明显的增高在恢复血清培养后, 体外增殖活性明显增强; HT-29干细胞体内生长速度比HT-29细胞体内生长速度显著要缓慢, HT-29细胞的肿瘤体积是HT-29干细胞肿瘤体积的两倍多; HT-29干细胞在小鼠富血管区(腋下和腹股沟淋巴结)的生长速率比皮下生长速率有明显的提高, 但与HT-29细胞的生长速率还有明显差距.

结论: 在结肠癌细胞株存在结肠癌干细胞, 通过无血清培养能分离出具有干细胞特征的结肠癌干细胞株, 结肠癌干细胞对5-Fu具有耐药性, 在适当微环境下其能快速生长, 转化为成熟的结肠癌细胞, 提示了改变结肠癌干细胞微环境可能是防止肿瘤复发的一个途径.

Keywords: 结肠癌干细胞; 分离; 成瘤特征; 临床意义

核心提示: 通过对结肠癌干细胞进行无血清培养, 以流式细胞仪检测CD133以及CD44的表达, 以5-氟尿嘧啶(5-flurouracil)进行处理结肠癌干细胞并观察其增殖抑制, 对结肠癌干细胞进行动物实验以确定其成瘤特征. 通过鉴定肿瘤干细胞, 寻找到调节肿瘤干细胞生物行为的因子, 将会给临床肿瘤的治疗起到巨大的推动作用.