研究快报
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世界华人消化杂志. 2015-05-18; 23(14): 2250-2255
Published online 2015-05-18. doi: 10.11569/wcjd.v23.i14.2250
慢病毒介导Survivin shRNA与结肠腺瘤息肉易感基因片段联合对HT-29细胞的影响
袁禧先, 隋子奇, 孙理婷, 张爽, 杨延涛, 薛鸿鹏, 葛文松, 王凤荣
袁禧先, 佳木斯大学附属第一医院消化二科 黑龙江省佳木斯市 154003
隋子奇, 孙理婷, 杨延涛, 佳木斯大学临床医学院 黑龙江省佳木斯市 154003
张爽, 齐齐哈尔市第一医院消化科 黑龙江省齐齐哈尔市 161005
薛鸿鹏, 黑龙江省医院消化内科 黑龙江省哈尔滨市 150030
葛文松, 上海交通大学医学院附属新华医院消化科 上海市 200000
王凤荣, 佳木斯大学附属第一医院研究生办公室 黑龙江省佳木斯市 154003
袁禧先, 教授, 主任医师, 硕士生导师, 主要从事胃肠道肿瘤基因诊断及治疗的研究.
基金项目: 2014年佳木斯大学研究生科技创新基金资助项目, No. LM2014_030; 黑龙江省2011年研究生创新科研资金资助项目, No. yjscx 2011-380HLJ; 黑龙江省自然科学基金资助项目, No. H201368.
作者贡献分布: 此课题由袁禧先与葛文松设计并指导实验完成; 实验操作由隋子奇、孙理婷、张爽及杨延涛共同完成; 数据分析由张爽与王凤荣完成; 杨延涛与薛鸿鹏完成论文写作.
通讯作者: 杨延涛, 154003, 黑龙江省佳木斯市学府街148号, 佳木斯大学临床医学院. 36400629@qq.com
电话: 0454-8606525
收稿日期: 2015-03-02
修回日期: 2015-03-27
接受日期: 2015-04-02
在线出版日期: 2015-05-18
Abstract

目的: 观察Survivin shRNA、结肠腺瘤息肉易感基因(adenomatous polyposis coli, APC)片段联合对HT-29细胞Survivin表达及细胞增殖的影响.

方法: 构建Survivin shRNA慢病毒载体、APC有效片段慢病毒载体, 对HT-29细胞分别采用单慢病毒载体侵染及联合侵染. 实验分阴性对照组、空载组、shRNA组、APC组、shRNA+APC联合组, 对侵染48 h后的HT-29细胞进行real-time PCR、Western blot及CCK8细胞增殖检测, 检测Survivin mRNA、蛋白表达水平及对细胞增殖的影响.

结果: (1)shRNA+APC联合组与其余各组相比, Survivin mRNA表达量显著下降(P<0.05); (2)shRNA+APC联合组与其余各组相比, 其Survivin蛋白抑制率明显高于其余各组(P<0.05); (3)shRNA+APC联合组与其余各组相比, 细胞增殖速度低于其余各组(P<0.05).

结论: Survivin shRNA与APC片段联合能抑制HT-29细胞内Survivin mRNA及蛋白的表达, 同时能够抑制细胞增殖能力, 并且优于单个基因侵染.

Keywords: 结肠癌; Survivin shRNA; APC有效片段; 慢病毒载体

核心提示: 双基因联合治疗对结肠癌HT-29细胞的增殖的抑制及对Survivin基因表达的抑制效果均优于单个基因治疗, 为进一步研究动物体内实验提供了一定的实验基础. 同时双基因及多基因联合也有望成为一种新的肿瘤治疗手段.