基础研究
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世界华人消化杂志. 2015-04-08; 23(10): 1568-1576
Published online 2015-04-08. doi: 10.11569/wcjd.v23.i10.1568
miRNA-19b对结肠癌细胞增殖活性的影响
程秀琴, 张迎娣, 张红杰
程秀琴, 张迎娣, 张红杰, 南京医科大学第一附属医院消化内科 江苏省南京市 210029
程秀琴, 在读硕士, 主要从事消化系统炎症性肠病的基础和临床研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81270469.
作者贡献分布: 此课题由张红杰设计; 研究过程由程秀琴与张迎娣操作完成; 数据分析由程秀琴与张迎娣完成; 本论文由张红杰与程秀琴撰写完成.
通讯作者: 张红杰, 主任医师, 210029, 江苏省南京市广州路300号, 南京医科大学第一附属医院消化内科. hjzhang06@163.com
电话: 025-68136255
收稿日期: 2015-01-24
修回日期: 2015-03-13
接受日期: 2015-03-18
在线出版日期: 2015-04-08
Abstract

目的: 探讨miR-19b对结肠癌细胞HT-29增殖的影响及可能的机制.

方法: 生物信息学软件预测miR-19b的靶基因, 采用脂质体介导的转染方法将miR-19b模拟物或抑制物转染到人结肠癌细胞系HT-29; 检测转染后miR-19b和靶基因的表达; 利用CCK8试剂盒检测细胞的增殖能力, 流式细胞术检测miR-19b对细胞增殖周期的影响.

结果: 在结肠癌细胞HT-29中高表达miR-19b可显著降低细胞因子信号转导抑制蛋白3(suppressor of cytokine signaling, SOCS3)的表达(P<0.01), 促进信号转导与转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3, STAT3)的磷酸化及细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的表达(P<0.01); 相反, 抑制miR-19b后细胞内SOCS3蛋白的表达显著增加(P<0.01), STAT3的磷酸化及cyclinD1的表达均下降(P<0.01). HT-29细胞内miR-19b的变化不影响细胞中SOCS3的mRNA水平. 同时, CCK8检测发现升高miR-19b的水平可促进细胞的增殖(P<0.05或P<0.01), 流式结果表明高表达miR-19b后处于增殖期细胞比例较对照组升高(P<0.01), 降低miR-19b的水平, 增殖期的细胞比例下降(P<0.05或P<0.01), 抑制细胞的增殖(P<0.01).

结论: miR-19b的表达可影响结肠癌细胞周期, 促进结肠癌细胞的增殖活性, 可能通过靶向调控SOCS3的表达来实现.

Keywords: 结肠肿瘤; miR-19b; 细胞增殖; 细胞周期

核心提示: miR-19b可能通过负性调控细胞因子信号转导抑制蛋白3(suppressor of cytokine signaling)的表达影响信号转导与转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3)的磷酸化, 促进细胞增殖, 诱导结肠癌的发生.