研究快报
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世界华人消化杂志. 2014-03-18; 22(8): 1112-1120
Published online 2014-03-18. doi: 10.11569/wcjd.v22.i8.1112
乌司他丁联合血必净对海水浸泡腹腔开放伤大鼠肠屏障功能的保护作用
周松, 张行健, 薛小军, 刘强, 张文华, 聂凯, 陈达丰, 江秀文
周松, 张行健, 薛小军, 刘强, 张文华, 聂凯, 陈达丰, 江秀文, 中国人民解放军第175医院普通外科 福建省漳州市 363000
周松, 副教授, 主任医师, 主要从事海水战创伤救治的研究.
基金项目: 南京军区科技创新基金资助项目, No. 08MA079.
作者贡献分布: 课题设计由周松与聂凯共同完成; 实验过程张行健、刘强及江秀文共同操作完成; 数据分析由薛小军、张文华与陈达丰完成; 本论文初稿写作、修改及定稿由张行健与周松完成.
通讯作者: 周松, 副教授, 主任医师, 363000, 福建省漳州市芗城区漳华中路269号, 中国人民解放军第175医院普通外科. zscxy@sina.com
电话: 0596-2975541
收稿日期: 2013-12-10
修回日期: 2014-01-09
接受日期: 2014-01-16
在线出版日期: 2014-03-18
Abstract

目的: 研究乌司他丁(ulinastatin, UTI)联合血必净对海水浸泡腹腔开放伤大鼠肠屏障功能的保护作用及机制.

方法: 104只♂Wistar大鼠随机分为13组: 对照组(A组), 海水浸泡腹腔开放伤生理盐水治疗1、3、6 h组(B组), UTI处理1、3、6 h组(C组), 血必净处理1、3、6 h组(D组), UTI联合血必净处理1、3、6 h组(E组); 每组8只, 分别在术后第1、3、6 h采集血液、小肠组织标本, 观察血浆二胺氧化酶、内毒素水平、小肠组织镜下病理学变化. 应用酶联免疫分析法检测血浆肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白介素6(interleukin-6, IL-6)、内毒素(endotoxin, ET)含量, 分光光度法检测血浆中二胺氧化酶(diamine oxidase, DAO), 黄嘌呤氧化酶法测定小肠超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性, 硫代巴比妥酸法检测小肠丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量, 荧光法检测小肠组织细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平. 非放射性凝胶迁移实验法检测小肠组织核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB, NF-κB) p65活性.

结果: 术后6 h, C组和D组较B组血浆SOD(75.34 U/mg±4.60 U/mg, 75.01 U/mg±4.22 U/mg vs 67.38 U/mg±4.20 U/mg, P<0.05)明显升高, 而血浆DAO(13.64 U/mL±1.08 U/mL, 13.87 U/mL±1.19 U/mL vs 17.06 U/mL±1.56 U/mL, P<0.05)、ET(0.635 eU/L±0.037 eU/L, 0.604 eU/L±0.027 eU/L vs 0.728 eU/L±0.038 eU/L, P<0.01)、TNF-α(122.10 pg/mL±9.72 pg/mL, 121.93 pg/mL±8.67 pg/mL vs 143.89 pg/mL±8.13 pg/mL, P<0.01)、IL-6(261.60 pg/mL±8.73 pg/mL, 268.06 pg/mL±6.87 pg/mL vs 293.42 pg/mL±10.44 pg/mL, P<0.01)、小肠组织镜下病理学评分、小肠组织MDA(5.29 nmol/mg±0.44 nmol/mg, 5.26 nmol/mg±0.42 nmol/mg vs 6.40±0.53 nmol/mg, P<0.01)、ROS含量(83.72 mg/mL±2.89 mg/mL, 74.69 mg/mL±2.94 mg/mL vs 130.13 mg/mL±3.89 mg/mL, P<0.01)、NF-κB p65(122.53±7.02, 98.61±7.86 vs 202.60±8.06, P<0.01)明显降低. E组较C组血浆DAO、ET、TNF-α、IL-6、小肠组织镜下病理学评分、小肠组织MDA、ROS、NF-κB p65明显降低(11.39 U/mL±1.23 U/mL vs 13.64 U/mL±1.08 U/mL, 0.528 eU/L±0.036 eU/L vs 0.635 eU/L±0.037 eU/L, 110.40 pg/mL±5.99 pg/mL vs 122.10 pg/mL±9.72 pg/mL, 213.88 pg/mL±11.69 pg/mL vs 261.60 pg/mL±8.73 pg/mL, 小肠, 4.74 nmol/mg±0.25 nmol/mg vs 5.29 nmol/mg±0.44 nmol/mg, 56.31 mg/mL±3.61 mg/mL vs 83.72 mg/mL±2.89 mg/mL, 61.05±6.69 vs 122.53±7.02, P<0.05), SOD明显升高(85.49 U/mg±3.87 U/mg vs 75.34 U/mg±4.60 U/mg, P<0.05); C、D组相比没有显著差异.

结论: UTI联合血必净对海水浸泡腹腔开放伤大鼠肠屏障功能有较好的保护作用, 其机制可能与抑制NF-κB及其相关炎症因子表达、减轻氧化应激损伤有关.

Keywords: 海水浸泡; 腹腔开放伤; 肠屏障损伤; 乌司他丁; 血必净

核心提示: 海水浸泡腹腔开放伤早期即可损伤肠屏障功能. 炎症因子介导的炎症反应及氧化应激损伤是海水浸泡腹腔开放伤后肠黏膜屏障功能障碍的主要原因. 伤后早期联合应用乌司他丁(ulinastatin)、血必净治疗, 可明显减轻氧自由基和脂质过氧化损伤, 抑制核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB, NF-κB)激活及炎症介质的释放, 明显保护海水浸泡腹部开放伤后肠屏障功能, 有效预防全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome)及多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome)的发生.