研究快报
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世界华人消化杂志. 2014-03-08; 22(7): 956-962
Published online 2014-03-08. doi: 10.11569/wcjd.v22.i7.956
H. pylori对人肝正常细胞L-02的作用及其分子机制
刘丽, 黄赞松, 黄衍强, 周喜汉
刘丽, 黄赞松, 广西医科大学研究生学院 广西壮族自治区南宁市 530021
黄赞松, 周喜汉, 右江民族医学院消化疾病研究所附属医院消化内科 广西壮族自治区百色市 533000
黄衍强, 右江民族医学院微生物免疫学教研室 广西壮族自治区百色市 533000
刘丽, 在读硕士, 主要从事肝癌基础和临床研究.
基金项目: 广西自然科学基金资助项目, No. 桂科自0542119; 广西教育厅重点课题基金资助项目, No. 桂教研重201202ZD078; 广西医疗卫生重点科研课题基金资助项目, No. 桂卫重200887.
作者贡献分布: 课题由黄赞松与黄衍强设计; 研究过程、数据处理、文章撰写及文献查阅由刘丽完成; 初稿修改由黄衍强完成; 终稿修改与审校由黄赞松与周喜汉负责.
通讯作者: 黄赞松, 教授, 主任医师, 硕士生导师, 533000, 广西壮族自治区百色市城乡路98号, 右江民族医学院消化疾病研究所附属医院消化内科. huangzansong@hotmail.com
电话: 0776-2846532
收稿日期: 2014-01-17
修回日期: 2014-02-02
接受日期: 2014-02-18
在线出版日期: 2014-03-08
Abstract

目的: 研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, H. pylori)对人肝正常细胞L-02(human normal liver cell line-02)的作用及转化生长因子β受体Ⅰ(transforming growth factor-beta typeⅠ, TβRⅠ)基因表达的影响.

方法: 体外培养L-02细胞、H. pylori; PCR法鉴定CagA+H. pylori和CagA-H. pylori, 采用不同浓度的CagA+H. pylori和CagA-H. pylori作用于L-02细胞24 h, 并设不加H. pylori的L-02细胞为阴性对照组; MTT法检测L-02细胞抑制率, 通过Real-time PCR法检测各组TβRⅠ基因的表达.

结果: MTT法结果显示, 随着CagA+H. pylori、CagA-H. pylori浓度升高, 对L-02细胞的抑制作用增强, 与阴性对照组相比, 差别均有统计学意义(P<0.05); 在同一浓度, CagA+H. pylori对细胞的抑制作用较CagA-H. pylori明显, 两组抑制率(%)分别为101 CFU/mL组10.960±0.231 vs 4.470±0.289; 102 CFU/mL组 25.310±0.398 vs 5.510±0.168; 103 CFU/mL组33.130±0.312 vs 10.330±0.213; 104 CFU/mL组54.570±0.245 vs 17.12±0.309; 105 CFU/mL组79.450±0.402 vs 25.830±0.337; 106 CFU/mL组90.210±0.271 vs 32.350±0.178, 各组比较均P<0.05; Real-time PCR法检测中, 随着CagA+H. pylori、CagA-H. pylori浓度升高, TβRⅠ表达逐渐升高, 在同一浓度, CagA+H. pylori促TβRⅠ表达作用较CagA-H. pylori明显, 两组TβRⅠ相对表达量分别为101 CFU/mL组1.650±0.101 vs 1.110±0.110; 102 CFU/mL组2.770±0.198 vs 1.200±0.203; 103 CFU/mL组4.590±0.112 vs 1.590±0.134; 104 CFU/mL组5.470±0.145 vs 1.990±0.331; 105 CFU/mL组7.450±0.102 vs 2.650±0.268; 106 CFU/mL组8.570±0.221 vs 4.570±0.161, 各组比较均P<0.05.

结论: H. pylori对人肝正常细胞L-02细胞具有抑制作用并与浓度相关, 菌液浓度越高, 抑制细胞增殖作用明显, CagA+H. pylori的抑制作用比CagA-H. pylori强. H. pylori对L-02细胞作用后TβRⅠ基因表达增高并与浓度相关, CagA+H. pylori的影响比CagA-H. pylori大. H. pylori对L-02细胞抑制作用的可能机制是通过TβRⅠ基因表达改变干扰转化生长因子-β1/Smads信号通路传导而影响其生长.

Keywords: 幽门螺杆菌; CagA; L-02细胞; 转化生长因子β受体Ⅰ

核心提示: 现代分子生物学研究发现转化生长因子β(transforming growth factor beta, TGF-β)/Smads信号通路在肝纤维化、肝炎、肝硬化、肝癌等过程中扮演着重要角色, 是目前分子生物学研究的热点之一. 本文研究发现幽门螺杆菌可通过调节转化生长因子β受体Ⅰ(transforming growth factor-beta typeⅠ, TβRⅠ)基因表达干扰TGF-β1/Smads信号通路传导可能是其抑制L-02细胞生长的分子机制之一.