基础研究
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世界华人消化杂志. 2014-12-28; 22(36): 5594-5601
Published online 2014-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v22.i36.5594
白藜芦醇对抗酒精诱导的SH-SY5Y细胞损伤作用: 氧化应激与凋亡
王明娟, 耿永芝, 刘景华, 侯志平, 何培元
王明娟, 承德医学院形态学实验中心 河北省承德市 067000
耿永芝, 承德县医院内一科 河北省承德市 067402
刘景华, 承德市中心医院神经外科 河北省承德市 067000
侯志平, 承德医学院病理教研室 河北省承德市 067000
何培元, 承德医学院附属医院消化内科 河北省承德市 067000
王明娟, 助理实验师, 主要从事消化系统疾病病理学的研究.
基金项目: 河北省卫生厅基金资助项目, No. 20110179.
作者贡献分布: 本课题设计由何培元与侯志平完成; 研究过程由王明娟、何培元、耿永芝及刘景华完成; 数据统计分析由王明娟与何培元完成; 论文写作由王明娟与侯志平完成; 由何培元完成论文的修改.
通讯作者: 何培元, 主治医师, 067000, 河北省承德市南营子大街36号, 承德医学院附属医院消化内科. peiyuanhe@163.com
电话: 0314-2279514 传真: 0314-2279514
收稿日期: 2014-10-13
修回日期: 2014-11-04
接受日期: 2014-11-12
在线出版日期: 2014-12-28
Abstract

目的: 探讨白藜芦醇在酒精诱导的SH-SY5Y细胞损伤中的抗氧化及抗凋亡作用, 揭示白藜芦醇抗酒精神经性损伤的作用机制.

方法: SH-SY5Y细胞经维甲酸诱导成正常神经细胞后以白藜芦醇预处理SH-SY5Y细胞24 h, 用酒精诱导氧化应激及凋亡的产生. MTT方法检测白藜芦醇处理组与对照组SH-SY5Y细胞活力; 用ELISA试剂盒检测不同实验组的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)及细胞内总活性氧(reactive oxygen species, ROS)含量、流式细胞术检测不同实验组细胞凋亡水平; 采用RT-PCR方法检测抗氧化应激凋亡通路中关键基因SOD1、SOD2、过氧化氢酶及Caspase3和PRAP的mRNA表达水平.

结果: MTT结果显示, 与对照组比较, 白藜芦醇(25、50、100 μmol/L)对SH-SY5Y细胞的细胞毒性均在20%以下, 300 mmol/L酒精可致近50% SH-SY5Y细胞死亡; 25-100 μmol/L白藜芦醇可有效对抗300 mmol/L酒精对SH-SY5Y引起的细胞毒性作用; SOD活性显示100 μmol/L白藜芦醇预处理组SOD含量(0.391±0.011)明显高于非处理组(0.286±0.019), 而ROS结果显示酒精诱导组(29234.79±2288)明显高于白藜芦醇25、50、100 μmol/L预处理组(18023.26±1359.66; 13528.44±1078.99; 8219.87±635.99); RT-PCR结果显示, 与300 mmol/L酒精比较, 25、50和100 μmol/L白藜芦醇可上调SOD1(0.623±0.032; 0.686±0.0213; 0.854±0.014)、SOD2(1.001±0.058; 0.938±0.021; 1.190±0.078)、过氧化氢酶(1.828±0.067, 2.018±0.079; 2.196±0.100) 及PARP(2.828±0.161; 3.018±0.208; 4.196±0.190)mRNA表达量; 不同剂量白藜芦均可下调Caspase3 mRNA表达量(5.828±0.367; 5.318±0.279; 4.196±0.200).

结论: 本实验结果揭示了300 mmol/L的酒精可以引起SH-SY5Y细胞氧化应激与凋亡的发生. 表明白藜芦醇通过介导氧化应激及氧化应激引起的抗凋亡途径发挥了神经保护作用

Keywords: 白藜芦醇; 氧化应激; SH-SY5Y; 抗氧化; 凋亡

核心提示: 本研究发现白藜芦醇通过介导氧化应激及氧化应激引起的抗凋亡途径发挥了神经保护作用. 实验数据表明白藜芦醇可降低酒精诱导引起的细胞内总活性氧(reactive oxygen species, ROS)增高, 提高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)含量及减少酒精引起的细胞凋亡, mRNA表达水平的检测证明白藜芦醇可以通过增加抗氧化酶的表达提高抗氧化酶活性, 加快活性氧自由基代谢, 抑制酒精引起的凋亡, 从而起到神经保护作用.