研究快报
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世界华人消化杂志. 2014-11-08; 22(31): 4785-4789
Published online 2014-11-08. doi: 10.11569/wcjd.v22.i31.4785
高表达p21增加5-Fu对胃癌细胞的杀伤作用及机制
王维民, 邓建良, 顾贤成, 汤月华, 张国强, 周炎
王维民, 邓建良, 顾贤成, 汤月华, 张国强, 周炎, 江苏大学附属宜兴医院肿瘤科 江苏省宜兴市 214200
王维民, 主治医师, 主要从事肿瘤化疗及分子靶向治疗的研究.
基金项目: 江苏省恶性肿瘤生物标志物与防治重点实验室开放课题基金资助项目, No. 11ZLKF09; 无锡市科技局医疗与公众健康技术研发基金资助项目, No. CSE31N1333.
作者贡献分布: 主要数据分析和文章起草由王维民完成; 基础实验、整理实验数据由王维民、邓建良、顾贤成、汤月华及张国强完成; 课题设计、文章修改和审阅由周炎完成.
通讯作者: 周炎, 主任医师, 214200, 江苏省宜兴市宜城街道通贞观路75号, 江苏大学附属宜兴医院肿瘤科. staff260@yxph.com
电话: 0510-87330801
收稿日期: 2014-07-21
修回日期: 2014-08-14
接受日期: 2014-09-17
在线出版日期: 2014-11-08
Abstract

目的: p21是一种重要的细胞周期负性调控因子, 目前其在胃癌化疗中的作用上不清楚. 本课题主要观察p21蛋白转染胃癌细胞后, 研究其对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-Fu)作用于胃癌细胞的敏感性影响及其可能的作用机制.

方法: 采用脂质体转染技术改变人胃癌细胞BGC823、SGC7901中p21蛋白变化, 应用免疫印迹鉴定p21蛋白表达; CCK8比色法检测p21蛋白转染后BGC823、SGC7901细胞株对5-Fu敏感性的变化; 采用流式细胞术分析细胞周期分布.

结果: 将p21质粒转染胃癌细胞后, 细胞中p21蛋白表达量明显增高, 与空载对照组比较具有统计学意义(P<0.05). p21高表达的胃癌细胞株对5-Fu敏感性明显增强, 与空载对照组、阴性对照组比较, 均具有统计学意义(P<0.01). p21高表达的细胞株处于G0/G1期比例明显增加, 而S、G2/M期细胞比例明显减少; 计算出细胞增殖指数(proliferation index, pI), 与空载对照组、阴性对照组比较, 均具有统计学意义(P<0.01). 同时p21下游的周期蛋白依赖性激酶蛋白CDK2、Cyclin E均明显降低, 与空载对照组、阴性对照组比较, 均具有统计学意义(P<0.01).

结论: p21蛋白能增加胃癌细胞珠对5-Fu的敏感性, 其作用可能是通过使细胞周期发生G0/G1期阻滞及下调CDK2、Cyclin E的表达来实现的.

Keywords: 胃癌; p21; 5-氟尿嘧啶; CDK2; Cyclin E

核心提示:p21基因是Clp家族中的一员, 是细胞周期负性调控基因, 可被野生型p53蛋白诱导表达而使细胞周期停滞于G1期. 本研究即采用脂质体转染技术改变p21蛋白变化, 以研究其对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)作用于胃癌细胞的敏感性影响及其可能的作用机制.