基础研究
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世界华人消化杂志. 2014-08-18; 22(23): 3403-3409
Published online 2014-08-18. doi: 10.11569/wcjd.v22.i23.3403
NF-κB对人结肠癌细胞上皮间质转化及侵袭转移的影响
刘宝玉, 黄杰安, 刘诗权, 李素艳, 徐春燕, 梁梦紫, 谭林, 覃蒙斌
刘宝玉, 黄杰安, 刘诗权, 李素艳, 徐春燕, 梁梦紫, 谭林, 覃蒙斌, 广西医科大学第一附属医院消化内科 广西壮族自治区南宁市 530021
刘宝玉, 硕士, 主要从事消化系肿瘤分子机制的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81260365; 广西自然科学基金资助项目, No. 2013GXNSFAA019159.
作者贡献分布: 此课题由刘宝玉与黄杰安设计; 研究过程由刘宝玉、刘诗权、覃蒙斌、李素艳、徐春燕、梁梦紫及谭林操作完成; 数据分析由刘宝玉与覃蒙斌完成; 本论文写作由刘宝玉完成; 黄杰安审校.
通讯作者: 黄杰安, 教授, 主任医师, 博士生导师, 530021, 广西壮族自治区南宁市双拥路6号, 广西医科大学第一附属医院消化内科. 1404991727@qq.com
电话: 0771-5356501
收稿日期: 2014-06-05
修回日期: 2014-06-19
接受日期: 2014-07-01
在线出版日期: 2014-08-18
Abstract

目的: 研究核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B, NF-κB)对人结肠癌细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)及侵袭和转移的影响.

方法: 将人结肠癌HCT116细胞分为NF-κB激活组, 抑制组和空白对照组. 分别用NF-κB活化激活剂肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α), 终浓度为20 ng/mL, NF-κB活化抑制剂吡咯烷二硫代甲酸铵(ammonium pyrrolidine- dithiocarbamate, PDTC), 终浓度为20 μmol/L干预HCT116细胞4 d. 采用相差显微镜观察细胞形态变化, Transwell小室模型观察细胞侵袭迁移能力变化, Western blot检测p65、P-p65、E-cadherin和N-cadherin的蛋白表达, QT-PCR检测E-cadherin和N-cadherin的mRNA表达.

结果: TNF-α可上调P-p65和N-cadherin的表达, 抑制E-cadherin的表达, 同时明显促进HCT116细胞的EMT形态发生(如细长丝状伪足和纺锤状细胞形成), 并使侵袭和迁移能力增强; 相反, PDTC则降低P-p65和N-cadherin的表达, 而增加E-cadherin的表达, 且抑制细胞的EMT形态发生(如伪足不明显, 细胞成多角形并紧密排列)及减弱细胞的侵袭迁移能力. 对照组、TNF-α组及PDTC组的侵袭细胞数(97.75±3.77 vs 118.50±1.95, 51.00±1.83); 迁移细胞数(140.00±4.32 vs 167.00±6.36, 80.00±2.53); N-cadherin mRNA的表达(1.00±0.00 vs 3.90±0.47, 0.08±0.02); E-cadherin mRNA的表达(1.00±0.00 vs 0.26±0.08, 6.03±0.59, 均P<0.05).

结论: NF-κB可以促进结肠癌HCT116细胞的EMT发生、侵袭和转移.

Keywords: NF-κB; 人结肠癌细胞; 上皮间质转化; 侵袭; 迁移

核心提示: 本研究采用化学方法调控转录因子-κB(nuclear factor-kappa B, NF-κB)的活性, 随后观察NF-κB不同活化状态下的上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)现象发生及细胞侵袭迁移能力改变, 从而评价NF-κB对结肠癌细胞株HCT116发生EMT及侵袭迁移能力的影响.