研究快报
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世界华人消化杂志. 2014-08-08; 22(22): 3274-3280
Published online 2014-08-08. doi: 10.11569/wcjd.v22.i22.3274
CCL21-CCR7诱导血管生成拟态形成在肝门部胆管癌微转移中的作用及机制
成雨, 欧琨, 朱文涛, 管清海, 林绪涛, 曹学峰, 陈雨信
成雨, 欧琨, 朱文涛, 管清海, 林绪涛, 曹学峰, 滨州医学院附属医院肝胆外科 山东省滨州市 256603
陈雨信, 山东大学齐鲁医院肝胆外科 山东省济南市 250012
成雨, 副教授, 副主任医师, 主要从事肝门部胆管癌的基础与临床研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81172044; 山东省自然科学基金资助项目, No. ZR2011HM016.
作者贡献分布: 此课题由成雨设计实施; 陈雨信指导; 实验操作由欧琨、朱文涛、管清海及林绪涛实施; 统计学分析由曹学峰完成; 论文由成雨完成.
通讯作者: 成雨, 副教授, 副主任医师, 256603, 山东省滨州市黄河二路661号, 滨州医学院附属医院肝胆外科. chyxchch@126.com
电话: 0543-3258597
收稿日期: 2014-04-15
修回日期: 2014-06-10
接受日期: 2014-06-19
在线出版日期: 2014-08-08
Abstract

目的: 探讨趋化因子受体CCR7诱导血管生成拟态形成促进了QBC939细胞的增殖、迁移和侵袭以及CCR7作用的信号途径.

方法: 应用三维细胞培养检测各组QBC939细胞中血管生成拟态形成; 细胞划痕实验、Transwell小室和Boyden小室检测CCL21-CCR7对QBC939细胞体外迁移、侵袭能力的影响; 应用MTT法检测CCL21-CCR7对QBC939细胞增殖能力的影响. Real-time PCR检测三组细胞株中CCR7及相关6个基因Twist1/GAPDH/IL-8/VEGF/PDEF/PDCD4的表达. 方差分析后组间比较采用LSD-t检验.

结果: 与对照组相比, CCR7过表达组形成VM能力和细胞增殖明显增强(t = 3.104, P<0.05), 而在CCR7沉默表达组形成VM和细胞增殖能力减弱(t = 2.971, P<0.05), 3组不同CCR7表达组加入CCL21形成VM和细胞增殖能力没有变化. 划痕实验、Transwell小室和Boyden小室测定细胞的运动、迁移和侵袭能力得到的结果一致, 与对照组相比, CCR7过表达组爬行能力、穿膜细胞数量明显增加(Transwell: t = 2.652; Boyden: t = 2.967, P<0.05), 而CCR7沉默组爬行能力、穿膜细胞数量明显减少(Transwell: t = 2.691; Boyden: t = 2.330, P<0.05); 在对照组和CCR7过表达组加入CCL21后爬行能力、穿膜细胞数量明显增加. qPCR检测发现, Twist1基因在3组细胞中的变化趋势同CCR7的变化一致.

结论: CCL21-CCR7生物学轴的不同表达影响了血管生成拟态的形成, 从而使胆管癌细胞的增殖能力、迁移和侵袭能力改变; CCR7影响VM形成、细胞增殖、迁移和侵袭的信号途径可能是通过Twist1的上皮-间质转化来实现的.

Keywords: CCR7; 血管生成拟态; 肝门部胆管癌; 微转移; Twist1

核心提示：肝门部胆管癌术后肝门区和肝脏的转移率及复发率很高, 血管生成拟态是肝门部胆管癌发生微转移的重要途径, CCL21-CCR7是一种重要的引诱物、在肿瘤淋巴归巢、血管生成及神经浸润方面有一定的作用, 本研究观察CCR7的不同表达对胆管癌的和血管生成拟态形成、增殖、迁移和侵袭的影响, 并探讨CCR7诱导血管生成拟态形成的分子信号途径. 为肝门部胆管癌临床治疗提供一定的基础.