基础研究
Copyright ©The Author(s) 2014. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2014-04-18; 22(11): 1504-1509
Published online 2014-04-18. doi: 10.11569/wcjd.v22.i11.1504
MiR-130a靶向调控CYLD基因及其对肝癌细胞增殖的影响
倪芳, 赵华, 汪心怡, 陈卓, 汪思应
倪芳, 赵华, 汪心怡, 陈卓, 汪思应, 安徽医科大学基础医学院病理生理学教研室 安徽省合肥市 230032
倪芳, 讲师, 主要从事肿瘤分子机制的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 31300715; 安徽省自然科学基金资助项目, No. 1308085QH136.
作者贡献分布: 倪芳与汪思应对此文所作贡献均等; 此课题由汪思应与倪芳设计; 研究过程主要由倪芳操作完成; 赵华、汪心怡及陈卓参与辅助工作; 数据分析由倪芳完成; 本论文写作由倪芳与汪思应完成.
通讯作者: 汪思应, 教授, 230032, 安徽省合肥市蜀山区梅山路81号, 安徽医科大学基础医学院病理生理学教研室. sywang@ahmu.edu.cn
电话: 0551-65137833
收稿日期: 2014-03-03
修回日期: 2014-03-22
接受日期: 2014-03-28
在线出版日期: 2014-04-18
Abstract

目的: 检测microRNA-130a(miR-130a)在肝癌中的表达水平及其对CYLD基因表达的调控, 并探讨miR-130a对肝癌细胞增殖的影响.

方法: 采用qRT-PCR检测miR-130a在原发性肝癌组织及对应的癌旁组织、肝癌细胞系和正常肝细胞中的表达差异, 利用靶基因预测分析软件预测miR-130a潜在靶基因CYLD后, 构建携带靶基因CYLD野生型及突变型3'UTR序列的双荧光素酶报告基因质粒, 应用双荧光素酶报告基因实验体系进行验证; 采用miR-130a抑制剂下调肝癌细胞系HepG2中miR-130a的表达, Western blot检测CYLD蛋白的表达变化; MTT法检测肝癌细胞增殖的改变.

结果: MiR-130a在原发性肝癌组织中的表达明显高于对应的癌旁组织(P<0.05), 在肝癌细胞系中的表达也显著高于正常肝细胞(P<=0.05); 双荧光素酶报告基因系统验证CYLD是miR-130a的直接靶基因; HepG2细胞中转染miR-130a抑制剂下调miR-130a表达后. Western blot检测结果显示CYLD蛋白表达水平显著上调; miR-130a抑制剂转染的HepG2细胞其增殖受到明显抑制.

结论: MiR-130a在肝癌中表达上调, 下调miR-130a后可以促进靶基因CYLD的表达, 并可以抑制肝癌细胞的增殖活性, miR-130a有可能成为原发性肝癌治疗的新靶点.

Keywords: 原发性肝细胞癌; MiRNA-130a; CYLD; 增殖

核心提示: MiR-130a在肝癌中表达上调, 下调miR-130a后可以促进靶基因CYLD的表达, 并可以抑制肝癌细胞的增殖活性, miR-130a有可能成为原发性肝癌治疗的新靶点.