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HBx蛋白与细胞膜钙离子通道蛋白Orai1的关系
王君, 何生松, 刘亚男, 张盼, 姚景宏, 华中科技大学同济医学院附属协和医院感染科 湖北省武汉市 430022
王君, 在读博士, 主要从事病毒性肝炎与肝癌病因机制的研究.
基金项目: 国家自然基金资助项目, No. 81001063.
作者贡献分布: 何生松与王君对此文所作贡献均等; 此课题设计由何生松与姚景宏完成; 研究过程由王君、刘亚男及张盼操作完成; 研究所用试剂及分析工具由姚景宏与何生松提供; 数据分析及本论文写作由王君完成; 何生松审校.
通讯作者: 何生松, 教授, 430022, 湖北省武汉市解放大道1277号, 华中科技大学同济医学院附属协和医院感染科. shengshexiehe@sina.cn
收稿日期: 2013-09-28
修回日期: 2013-10-28
接受日期: 2013-11-19
在线出版日期: 2014-01-08
修回日期: 2013-10-28
接受日期: 2013-11-19
在线出版日期: 2014-01-08
Abstract
目的: 研究乙型肝炎病毒x基因(hepatitis B virus x gene, HBx)蛋白调节细胞内钙离子可能分子机制, 揭示乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)诱导肝癌的可能途径.
方法: 培养HEK293细胞, 取第2代HEK293细胞转染pcDNA-HBx质粒, 培养12、24和48 h后, 细胞活力细胞毒性检测(cell counting kit-8, CCK-8)观察转染后细胞生长情况, Western blot检测HBx蛋白的表达情况, 当共同转染HBx基因、Orai1基因或STIM1基因后co-IP实验、免疫荧光检测观察细胞内蛋白结合情况.
结果: 转染pcDNA-HBx质粒后HBx蛋白可以在HEK293细胞高表达, 转染后的24 h后细胞增殖加快(P<0.05), co-IP实验及免疫荧光检测结果均显示, HBx蛋白在细胞内可以与Orai1蛋白结合.
结论: HBx蛋白通过与细胞膜钙离子通道Orai1结合, 来升高细胞内钙离子浓度, 从而影响细胞增殖等活性.
Keywords: 乙型肝炎病毒x蛋白; Orai1蛋白; 乙型肝炎病毒; 钙离子; 肝癌
核心提示: 本研究首次发现在细胞内乙肝病毒x基因(hepatitis B virus x gene, HBx)蛋白可以与SOCs在细胞膜上的孔蛋白Orai1蛋白相互作用, 这可能是HBx蛋白通过内质网途径调节细胞内钙离子平衡的重要途径, 从而影响细胞生物活性, 加速肝细胞恶性转变.