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USP22和Nanog在结肠癌组织中的表达及临床意义
张丰云, 中国人民解放军第四军医大学西京医院肿瘤科 陕西省西安市 710032
管静芝, 中国人民解放军第309医院肿瘤科 北京市 100091
赵慧霞, 李秋文, 董伟伟, 段昕妤, 朱建华, 王如良, 郝怡鑫, 叶明, 肖文华, 解放军总医院第一附属医院肿瘤科 北京市 100048
张丰云, 主要从事肿瘤学的相关研究.
基金项目: 解放军总医院苗圃基金资助项目, No. 09KMM30.
作者贡献分布: 本实验由肖文华、管静芝及张丰云设计; 研究过程和标本收集由张丰云、管静芝、赵慧霞、李秋文、董伟伟、段昕妤、朱建华、王如良、郝怡鑫及叶明完成; 研究所用试剂和分析工具由肖文华提供; 数据分析由张丰云、管静芝及肖文华完成; 本论文写作由张丰云、管静芝及肖文华完成.
通讯作者: 管静芝, 副主任医师, 硕士生导师, 100091, 北京市海淀区黑山扈甲17号, 中国人民解放军第309医院肿瘤科. jzjz1970@hotmail.com
收稿日期: 2012-12-04
修回日期: 2013-02-21
接受日期: 2013-03-01
在线出版日期: 2013-03-18
修回日期: 2013-02-21
接受日期: 2013-03-01
在线出版日期: 2013-03-18
Abstract
目的: 探讨粪便miR34b/c甲基化状态的检测在结直肠癌早期诊断中的意义.
方法: 从126例结直肠癌患者癌组织、癌旁组织、粪便和64例正常对照者的粪便中分别提取DNA, 采用多重置换扩增(multiple displacement amplification, MDA)技术对经过亚硫酸氢盐修饰样本进行全基因组扩增, 结合甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR, MSP)检测组织和粪便中miR34b/c基因甲基化状态.
结果: 结直肠癌癌组织miR34b/c基因的甲基化阳性率为95.2%(120/126), 对应的癌旁正常组织为11.9%(15/126), 两者比较有显著差异(P<0.01); miR34b/c甲基化状态与各临床病理参数无显著相关(P>0.05). 结直肠癌粪便miR34b/c甲基化阳性率为90.2%(111/123), 显著高于正常对照7.8%(5/64), 差异有统计学意义(P<0.01). 粪便DNA miR34b/c用于结直肠癌早期诊断的敏感性为91.2%, 特异性为92.2%.
结论: miR34b/c甲基化是结直肠癌的重要分子特征, 检测粪便miR34b/c甲基化有望成为结直肠癌早期诊断的一个全新的肿瘤标志物. MDA结合MSP为miRNA的甲基化分析提供了一种较理想的研究手段.
Keywords: miR34b/c; 甲基化特异性PCR; 多重置换扩增; 粪便