临床经验
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世界华人消化杂志. 2013-11-18; 21(32): 3592-3597
Published online 2013-11-18. doi: 10.11569/wcjd.v21.i32.3592
miR-320在结直肠癌中的表达及意义
张丹华, 董明, 周建平
张丹华, 董明, 周建平, 中国医科大学附属第一医院普通外科教研室胃肠外科 辽宁省沈阳市 110001
张丹华, 博士生, 主要从事结直肠癌相关基因及蛋白改变与其临床意义的研究.
基金项目: 辽宁省教育厅科技基金资助项目, No. 2008809.
作者贡献分布: 张丹华主要负责研究过程与数据分析; 董明与周建平负责科研设计、试剂提供及论文写作.
通讯作者: 周建平, 教授, 硕士生导师, 110001, 辽宁省和平区北二马路南京北街155号, 中国医科大学附属第一医院胃肠外科. zjphama@163.com
电话: 024-83282881
收稿日期: 2013-07-08
修回日期: 2013-07-31
接受日期: 2013-10-20
在线出版日期: 2013-11-18
Abstract

目的: 探讨miR-320与结直肠癌临床病理因素间的关系, 寻找其下游调控蛋白, 及对结直肠癌细胞化疗敏感性的影响.

方法: 采用RT-PCR检测83例结直肠癌组织及癌旁组织中miR-320的表达, 结合结直肠癌临床病理指标分析其相关性, 用miR-320病毒转染HCT-116及ClonA1两株结直肠癌细胞系, Western blot检测其调控蛋白C-Jun氨基端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)的表达, 采用四甲基偶氮唑蓝显色法(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)检测LV-miR-320细胞株与阴性对照组间对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-Fu)化疗的敏感性.

结果: 83例结直肠癌标本中miR-320的表达明显低于癌旁组织表达(P = 0.012). miR-320表达与肿瘤分化程度相关, 高分化组织中表达较中低分化组织高, 与局部浸润深度及TNM分期相关(P = 0.012, P = 0.004), 但不受患者性别、年龄、肿瘤的大小及位置的影响; 获得LV-miR-320稳定转染细胞株及阴性对照株(negative control, NC), Western blot结果显示LV-miR-320组JNK表达明显降低; LV-miR-320组HCT-116及ClonA1半数抑制浓度(IC50值)分别为11.34 μg/mL和12.56 μg/mL, NC组IC50值分别为24.73 μg/mL和25.34 μg/mL(P = 0.023, P = 0.018).

结论: miR-320在结直肠癌组织中呈低表达, 其在结直肠癌细胞中过表达后, 可明显抑制JNK蛋白翻译, 而显著增加细胞对5-Fu化疗的敏感性. 提示miR-320在结直肠癌的发生发展及治疗中起重要作用.

Keywords: miR-320; C-Jun氨基端激酶; 结直肠癌; 化疗敏感性

核心提示: miR-320是新近发现的miRNA, 其在结直肠癌中的表达及其调控靶基因罕见研究报道, 本实验发现miR-320与结直肠癌的发生发展相关, 可部分降低下游c-Jun氨基末端激酶的表达, 在细胞水平, miR-320过表达可显著提高结直肠癌细胞对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)化疗的敏感性, 使其有可能成为结直肠治疗的重点. 但他在结直肠癌及其他肿瘤发生发展中的具体作用机制尚不明确, 有待于我们进一步的实验研究.