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Survivin对人胆管癌细胞凋亡相关信号通路的作用机制
卢昕, 肖新波, 武汉市第一医院胃肠外科 湖北省武汉市430022
卢昕, 副主任医师, 主要从事外科分子生物学的研究.
基金项目: 武汉市卫生局基金资助项目, No. 0270819.
作者贡献分布: 卢昕与肖新波对此文所作贡献均等; 此课题由卢昕与肖新波设计; 研究过程由卢昕操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由肖新波提供; 数据分析由卢昕完成; 本论文写作由卢昕完成.
通讯作者: 卢昕, 副主任医师, 430022, 湖北省武汉市硚口区中山大道215号, 武汉市第一医院胃肠外科. luxin2002wh2002@yahoo.com.cn
电话: 027- 85332695
收稿日期: 2011-11-13
修回日期: 2011-12-19
接受日期: 2012-03-10
在线出版日期: 2012-03-18
修回日期: 2011-12-19
接受日期: 2012-03-10
在线出版日期: 2012-03-18
Abstract
目的: 探讨Survivin基因对人胆管癌细胞凋亡信号通路的调节机制.
方法: 构建针对Survivin基因的siRNA和对照siRNA, 分别转染QBC939人胆管癌细胞, Western blot检测siRNA对细胞Survivin的干扰效果. 继而分别用流式细胞仪, 激酶活性测定和Western blot检测不同Survivin表达状态下, QBC939细胞的凋亡状态, caspase-3的活性和caspase-3, caspase-9及procaspase-9凋亡信号分子的表达.
结果: siRNA-Survivin显著抑制Survivin在QBC939细胞的表达(P<0.05). Survivin表达抑制后, QBC939细胞凋亡明显增加(18.9%±2.3%, P<0.05), caspase-3活性显著升高(0.83±0.15, P<0.01), caspase-3和caspase-9表达明显上调(P<0.05), 而procaspase-9表达降低(P<0.05). 未转染和转染对照siRNA的QBC939细胞上述变化无显著性差异(P>0.05).
结论: Survivin基因通过促进procaspase-9的活化以阻止caspase-3和caspase-9的激活从而抑制胆管癌细胞的凋亡.
Keywords: Survivin基因; 凋亡; 胆管癌细胞