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shRNA沉默干扰HMGA2基因对胃癌细胞株MKN-45的增殖与凋亡的影响
陈家庄, 赖铭裕, 韦丽秀, 广西医科大学第一附属医院老年消化内科 广西壮族自治区南宁市 530021
陈家庄, 在读硕士, 主要从事胃癌发病机制方面的研究.
基金项目: 广西医疗卫生重点科研基金资助项目, No. 重2010021; 广西自然科学基金资助项目, No. 2010GXNSFA013166.
作者贡献分布: 陈家庄与赖铭裕对此文所作贡献均等; 本论文写作、数据分析由陈家庄与赖铭裕完成; 实验设计、资金申请及论文审阅指导由赖铭裕完成; 实验操作由陈家庄与韦丽秀完成.
通讯作者: 赖铭裕, 副教授, 530021, 广西壮族自治区南宁市, 广西医科大学第一附属医院老年消化内科. laimingyu2005103@yahoo.com.cn
电话: 0771-2665673
收稿日期: 2011-12-02
修回日期: 2011-12-31
接受日期: 2012-01-13
在线出版日期: 2012-01-28
修回日期: 2011-12-31
接受日期: 2012-01-13
在线出版日期: 2012-01-28
Abstract
目的: 观察小分子RNA(shRNA)沉默后HMG-A2基因在胃癌细胞株MKN-45的表达, 并探讨HMGA2基因对胃癌细胞的增殖与凋亡的影响.
方法: 构建针对人HMGA2基因的shRNA真核表达载体, 瞬时转染人胃癌细胞株MKN-45. 用细胞免疫组化的方法观察转染72 h后HMGA2的蛋白表达水平, 以MTT比色法、流式细胞术检测转染后MKN-45细胞的生长增殖、凋亡的情况.
结果: 转染HMGA2-shRNA组的蛋白表达强度(171.34±19.61)明显弱于scrambled组(143.48±19.04)和空白对照组(141.79±18.09, P<0.05), 较之scrambled组(5.66%±0.63%)和空白对照组, HMGA2-shRNA组(39.32%±2.37%)能明显抑制细胞的增殖(P<0.05), HMGA2-shRNA组的凋亡率(39.67%±2.35%)与scrambled组(4.29%±1.33%)和空白对照组(5.05%±1.84%)相比明显增加(P<0.05).
结论: 靶向HMGA2基因的shRNA可以有效抑制人胃癌MKN-45细胞的生长, 并促进细胞的凋亡, HMGA2可能是胃癌治疗的一个潜在靶点.
Keywords: 高迁移率蛋白A2; 短发夹RNA; 胃癌细胞株MKN-45; 细胞增殖; 细胞凋亡