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三硝基苯磺酸诱导小鼠溃疡性结肠炎模型制备的技术改良
徐阳, 刘海峰, 辽宁医学院武警总医院研究生培养基地 武警总医院消化内科 北京市 100039
徐阳, 李伟光, 张成岗, 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室 全军军事认知与心理卫生研究中心 北京市 100850
徐阳, 硕士研究生, 主要从事消化系统疾病相关研究.
作者贡献分布: 本文由徐阳撰写; 李伟光、张成岗及刘海峰审校.
通讯作者: 刘海峰, 教授, 100039, 北京市, 武警总医院消化内科. haifengliu333@163.com
电话: 010-66930210
收稿日期: 2011-09-06
修回日期: 2011-11-20
接受日期: 2011-12-28
在线出版日期: 2012-01-18
修回日期: 2011-11-20
接受日期: 2011-12-28
在线出版日期: 2012-01-18
Abstract
目的: 改良2, 4, 6-三硝基苯磺酸(TNBS)硅胶管灌肠诱导制备小鼠溃疡性结肠炎(UC)模型的方法, 提高造模的成功率和模型的稳定性, 并探索造模的适宜剂量和时间.
方法: 选用40只SPF级♂Balb/c小鼠, 6-8周龄, 随机分为正常对照组、不同浓度TNBS组(37.5 mg/kg、75 mg/kg、150 mg/kg、200 mg/kg), 每组8只, 使用"灌胃针"替代"硅胶管"灌肠, 并于灌肠后2 d和4 d分别处死4只小鼠, 观察不同组别小鼠生理状态、结肠组织的损伤及病理学的改变情况.
结果: 在"灌胃针"造模过程中未发生小鼠死亡现象; 对照组小鼠一般情况及结肠黏膜组织无异常改变; 小鼠灌肠后出现少食、少动、体质量下降、皮毛光泽度下降、腹泻、便血. 不同浓度TNBS造模组随着TNBS剂量的增加, 小鼠结肠黏膜组织出现充血、出血、水肿、炎症、溃疡的程度增加. HE染色可见结肠组织水肿、炎症细胞浸润、杯状细胞缺失、溃疡形成的程度逐渐增加. 其中TNBS 37.5 mg/kg、75 mg/kg组于造模后2 d, 以上损伤现象开始缓解, 未形成稳定的UC模型; 150 mg/kg、200 mg/kg组持续时间较长, 以上损伤现象4 d内未见明显缓解, 150 mg/kg组表现为较典型的UC模型, 200 mg/kg为重症UC模型.
结论: 对制造小鼠UC模型进行相关技术改进, 使灌肠更加简便, 提高造模效率, 显著增加了模型的稳定性.
Keywords: 溃疡性结肠炎; 灌胃针; 三硝基苯磺酸