基础研究
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世界华人消化杂志. 2012-05-08; 20(13): 1088-1093
Published online 2012-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v20.i13.1088
表氧化二十碳三烯酸对游离脂肪酸诱导胰岛β细胞凋亡的抑制作用
吴斌, 张玫, 吕瑞雪, 罗通行, 李一松, 王兰兰
吴斌, 张玫, 吕瑞雪, 罗通行, 李一松, 王兰兰, 四川大学华西医院实验医学科 四川省成都市 610041
吴斌, 讲师, 博士, 主要从事消化系统疾病的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81101326.
作者贡献分布: 吴斌与张玫对此文所作贡献均等; 此课题由吴斌设计; 流式细胞检测由张玫操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由吕瑞雪提供; 原代细胞培养与处理由罗通行与李一松完成; 数据分析由吴斌、张玫及王兰兰完成; 本论文写作由吴斌完成.
通讯作者: 王兰兰, 教授, 主任检验师, 博士研究生导师, 610041, 四川省成都市外南国学巷37号, 四川大学华西医院实验医学科. wchcbc@yahoo.com.cn
电话: 028-85422615 传真: 028-85423496
收稿日期: 2012-02-01
修回日期: 2012-03-05
接受日期: 2012-03-25
在线出版日期: 2012-05-08
Abstract

目的: 研究11,12-表氧化二十碳三烯酸(11, 12-epoxyeicosatrienoic acids, 11,12-EETs)抑制游离脂肪酸(free fatty acids, FFAs)对原代小鼠胰岛β细胞凋亡的影响, 探讨11,12-EETs保护胰岛β细胞是否通过抑制内质网应激相关转录因子ATF4与ATF6核转位来实现.

方法: 棕榈酸(palmitic acids, PA)诱导原代小鼠胰岛β细胞凋亡, 与11,12-EETs共同孵育24 h后, 采用流式细胞术检测该细胞的线粒体膜电位的变化与细胞凋亡水平的改变, 以观察11,12-EETs对原代小鼠胰岛β细胞的保护作用; 用免疫印迹法检测内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)相关转录因子ATF4与ATF6在胞浆与胞核中的蛋白表达, 以此观察二者的核转位改变.

结果: 100 nmol/L 11,12-EETs与400 μmol/L PA共同孵育胰岛β细胞24 h后, 与FFAs对照组相比, FFAs+EET组可显著提升胰岛β细胞的存活率(62.1%±7.3% vs 53.0%±6.1%), 并明显降低胰岛β细胞线粒体的去极化水平(23.6%±3.4% vs 35.2%±4.7%); 11,12-EETs可有效抑制PA诱导的细胞凋亡(24.5%±4.2% vs 40.1%±5.6%); 同时, PA刺激的ATF4与ATF6的核转位受到11,12-EETs的影响, 胞核ATF4与ATF6蛋白水平显著性降低, 胞浆ATF4与ATF6蛋白水平明显上调.

结论: 11,12-EETs可以抑制FFAs诱导的凋亡, 其分子机制可能是通过抑制FFAs引发的ATF4与ATF6转位导致内质网应激相关基因表达.

Keywords: 游离脂肪酸; 11,12-表氧化二十碳三烯酸; 内质网应激; 转录激活因子4; 转录激活因子6; 小鼠胰岛β细胞