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RNAi对结肠癌SW480细胞Nucleostemin基因表达的影响
潘振国, 王园园, 范里, 钱伟, 宋宇虎, 朱良如, 华中科技大学同济医学院附属协和医院消化内科湖北省武汉市 430022
作者贡献分布: 此课题由朱良如设计; 实验由潘振国完成, 王园园、范里、钱伟及宋宇虎协助完成; 论文写作由潘振国完成.
通讯作者: 朱良如, 副教授, 副主任医师, 430022, 湖北省武汉市, 华中科技大学同济医学院附属协和医院消化内科. zhuliangru05@126.com
收稿日期: 2011-10-20
修回日期: 2011-11-23
接受日期: 2011-12-23
在线出版日期: 2012-01-08
修回日期: 2011-11-23
接受日期: 2011-12-23
在线出版日期: 2012-01-08
Abstract
目的: 探求RNA技术干扰人结肠癌SW480细胞Nucleostemin(NS)基因后, 结肠癌SW480细胞Nucleostemin mRNA和蛋白水平的表达, 及细胞增殖情况变化.
方法: 构建Nucleostemin特异性真核表达载体, 和脂质体共同转染SW480细胞后, 采用Real-time PCR和Western blot方法检测NS基因mRNA和蛋白变化, MTT法检测细胞的增殖情况.
结果: 与对照组相比较, RNAi干扰细胞后NS mRNA表达明显下降; NS蛋白表达亦明显下降(1.069±0.368, 1.003±0.313, 1.901±0.817, P<0.05; 1.069±0.368, 1.003±0.313, 2.035±0.665, P<0.05), 空白对照组(仅加入脂质体)和阴性对照组(RNAi错义序列)间无显著差异(2.035±0.665, 1.9001±0.817, P>0.05). MTT显示RNA干扰后细胞增殖明显受到抑制.
结论: 通过特异性RNA干扰NS基因后, 结肠癌SW480细胞增殖受到抑制.
Keywords: Nucleostemin; RNA干扰; SW480结肠癌细胞系; 增殖