研究快报
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世界华人消化杂志. 2011-03-28; 19(9): 940-945
Published online 2011-03-28. doi: 10.11569/wcjd.v19.i9.940
TIM4对小鼠食物过敏模型中抗原特异性Th2细胞分化的影响
杨慧敏, 郑鹏远, 刘志强, 李付广, 王新亭
杨慧敏, 郑鹏远, 刘志强, 王新亭, 郑州大学第二附属医院消化内科 郑州大学医学微生态学研究所 河南省郑州市 450014
李付广, 郑州大学基础医学院微生物与免疫教研室 河南省郑州市 450052
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30772028.
作者贡献分布: 杨慧敏与郑鹏远对此文贡献均等; 此课题由杨慧敏与郑鹏远设计; 研究过程由杨慧敏、刘志强及王新亭完成; 研究所用新试剂和分析工具由郑鹏远与李付广提供; 数据分析由杨慧敏完成; 本论文写作由杨慧敏、郑鹏远及刘志强完成.
通讯作者: 郑鹏远, 教授, 主任医师, 博士生导师, 450014, 河南省郑州市经八路2号, 郑州大学第二附属医院消化内科, 郑州大学医学微生态学研究所. medp7123@126.com
电话: 0371-63921467 传真: 0371-63934118
收稿日期: 2010-12-28
修回日期: 2011-03-08
接受日期: 2011-03-16
在线出版日期: 2011-03-28
Abstract

目的: 研究微生物产物对树突状细胞(dendritic cell, DC)和TIM4的作用, 探讨在微生物产物参与的食物过敏(food allergy, FA)中TIM4对CD4+ T淋巴细胞分化的影响.

方法: 培养Balb/c小鼠骨髓来源的树突状细胞(bone marrow-derived DC, BMDC), 培养的DC分为两组: 金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)刺激组和空白对照组, RT-PCR检测不同组DC的TIM4 mRNA表达; 流式细胞仪检测DC表面CD11c、MHC-Ⅱ、CD86的表达. 在DC和CD4+ T淋巴细胞共同培养中将培养的DC分为5组: 空白对照组、SEB+卵清蛋白(OVA)组、SEB组、OVA组及TIM4组, 同时取过敏模型小鼠脾脏CD4+ T淋巴细胞, 不同组的DC与CD4+ T淋巴细胞共同培养, ELISA法测定混合培养细胞上清液IL-4与IFN-γ的表达.

结果: 与空白对照组相比, SEB组DC TIM4 mRNA表达明显增高(0.941±0.018 vs 0.422±0.083, P<0.05), 并具有剂量依从性. SEB组DC表面分子MHC-Ⅱ、CD86表达明显高于空白对照组(MHC-Ⅱ: 76.684%±3.1803% vs 52.984%±3.6026%; CD86: 89.746%±2.113% vs 67.558%±0.4341%, 均P = 0.000). DC和CD4+ T淋巴细胞共同培养中, 相比空白对照组, SEB+OVA组IL-4表达显著增高(295.834±20.408 vs 78.335±13.109, P<0.05), 而IFN-γ的表达明显减少(362.109±92.271 vs 761.897±102.967, P<0.05); 单独的SEB组或OVA组IL-4和IFN-γ与空白对照组无明显差异; TIM4组中IL-4的表达水平较SEB+OVA组明显降低, 而IFN-γ的表达明显增高(90.511±15.500 vs 295.834±20.408; 807.734±95.436 vs 362.109±92.271, 均P<0.05).

结论: 微生物产物和食物抗原共同作用导致FA, TIM4参与FA的发生. 消除TIM4的表达可明显抑制Th2细胞分化, 有效纠正Th1/Th2细胞失衡, 可阻止过敏性免疫反应.

Keywords: TIM蛋白; 树突状细胞; Th2细胞; 食物过敏; 金黄色葡萄球菌肠毒素B; 卵清蛋白