基础研究
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世界华人消化杂志. 2011-12-28; 19(36): 3649-3655
Published online 2011-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v19.i36.3649
CD117阳性细胞亚群在肝癌细胞系HepG2中的分离及其特性
容雁, 王云霞, 孙立新, 张晓艳, 杨治华, 冉宇靓, 孙力超
容雁, 张晓艳, 杨治华, 孙力超, 广西医科大学附属肿瘤医院 广西壮族自治区南宁市 530021
王云霞, 孙立新, 冉宇靓, 中国医学科学院北京协和医学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室 北京市 100021
容雁, 广西医科大学附属肿瘤医院在读硕士, 主要从事肿瘤干细胞的靶向治疗研究.
基金项目: 国家重点基础研究发展计划(973计划)基金资助项目, No. 2009CB521804;国家科技重大专项基金资助项目, No. 2011ZX09102-010-02.
作者贡献分布: 容雁、杨治华及孙力超对此文所作贡献均等; 此课题由杨治华与孙力超设计; 研究过程由容雁、王云霞、孙立新及张晓艳操作完成; 研究所用试剂由杨治华与冉宇靓提供; 数据分析由容雁与王云霞完成, 本论文写作由容雁完成.
通讯作者: 孙力超, 助理研究员, 530021, 广西壮族自治区南宁市, 广西医科大学附属肿瘤医院. sunlichao_1980@hotmail.com
收稿日期: 2011-10-19
修回日期: 2011-12-05
接受日期: 2011-12-18
在线出版日期: 2011-12-28
Abstract

目的: 观察从人肝癌细胞系HepG2中分离的CD117+细胞生物学行为, 探讨肝癌中CD117+细胞亚群的干细胞特性.

方法: 采用无血清悬浮培养法培养HepG2细胞, 流式细胞术检测HepG2及球体细胞中CD117的表达比例. 用流式细胞分选技术从HepG2成球细胞中分离CD117+的肿瘤细胞, 进行无血清悬浮培养, 观察其成球能力. CCK-8法观察CD117+细胞的增殖能力和顺铂对CD117+细胞的抑制率, 计算IC50和耐药指数(RI).

结果: HepG2细胞能在无血清培养基中存活、增殖并形成细胞球, 成球率为6.21%±2.03%; 流式细胞检测发现球体细胞中CD117+细胞的比例比HepG2细胞提升了9倍; CD117+细胞在无血清培养基中成球率和增殖能力均显著高于未分选细胞和CD117-细胞; CD117+细胞在各浓度的顺铂作用下抑制率均较未分选细胞和CD117-细胞明显降低, 三者IC50分别为12.229 μmol/L、7.970 μmol/L 和7.345 μmol/L, CD117+细胞和未分选细胞耐药系数RI为1.165和1.076.

结论: 人肝癌细胞系HepG2中的CD117+细胞是具有肿瘤干细胞特性的细胞亚群, CD117可能是肝癌干细胞的候选表面分子标志物.

Keywords: 肝癌; 肿瘤干细胞; HepG2; CD117