基础研究
Copyright ©The Author(s) 2011. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2011-10-08; 19(28): 2913-2918
Published online 2011-10-08. doi: 10.11569/wcjd.v19.i28.2913
沉默CXCR4基因对食管鳞癌EC-9706细胞中MMP-9基因表达的影响
刘剑, 王峰, 朱利楠, 何炜, 王留兴, 樊青霞
刘剑, 王峰, 朱利楠, 何炜, 王留兴, 樊青霞, 郑州大学第一附属医院肿瘤科 河南省郑州市 450052
刘剑, 在读博士, 主要从事肿瘤的生物学治疗的研究.
基金项目: 河南省科技厅科技攻关基金资助项目, No. 72102310054.
作者贡献分布: 此课题由樊青霞与刘剑设计; 研究过程由刘剑、王峰及朱利楠操作完成; 研究所用试剂及分析工具由王峰、王留兴及樊青霞提供; 数据分析由何炜完成; 本论文写作由刘剑完成.
通讯作者: 樊青霞, 教授, 主任医师, 博士生导师, 450052, 河南省郑州市, 郑州大学第一附属医院肿瘤科. fqx2243@yahoo.com.cn
收稿日期: 2011-06-24
修回日期: 2011-08-27
接受日期: 2011-10-06
在线出版日期: 2011-10-08
Abstract

目的: 探讨在食管鳞癌EC-9706细胞中沉默CXCR4基因对MMP-9基因表达的影响, 为阐明CXCR4基因在食管鳞癌侵袭转移中的作用提供实验依据.

方法: 化学合成2条靶向CXCR4基因的siRNA1和siRNA2, 同时设立荧光标记阴性对照和空白对照. 脂质体法转染入EC-9706细胞, 荧光显微镜下观察转染效率. 转染48 h后, 半定量RT-PCR检测各组细胞CXCR4和MMP-9基因mRNA表达的变化, Western blot检测各组细胞CXCR4和MMP-9基因蛋白表达的变化, 侵袭小室检测各组细胞穿膜细胞数的变化, MTT检测各组细胞的A值.

结果: 与阴性对照和空白对照相比, 转染CXCR4 siRNA1和siRNA2组细胞CXCR4 mRNA和蛋白的表达明显降低, 差异具有统计学意义(P<0.05); 同时与阴性对照和空白对照相比, 转染CXCR4 siRNA1和siRNA2组细胞MMP-9 mRNA和蛋白的表达同样明显降低, 差异具有统计学意义(P<0.05); 转染CXCR4 siRNA1和siRNA2组细胞穿膜细胞数与阴性对照和空白对照相比明显下降, 差异具有统计学意义(P<0.05); MTT结果显示转染CXCR4 siRNA1和siRNA2组细胞增殖能力下降, 与阴性对照和空白对照相比差异具有统计学意义(P<0.05).

结论: 在食管鳞癌EC9706中存在CXCR4基因对MMP-9基因的调控作用, CXCR4基因有可能通过调控MMP-9基因的表达参与食管鳞癌细胞的浸润转移, CXCR4有可能成为食管鳞癌基因治疗的有效靶点.

Keywords: 食管鳞癌; CXC趋化因子受体4; 基质金属蛋白酶-9; 基因调控